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    20    0.303    0.131    0.1010    0.0437    56.77
    25    0.437    0.193    0.1458    0.0643    55.90
    30    0.498    0.218    0.1661    0.0727    56.23
    将对应的数据代入以上公式,即可求得空白斜率、农药斜率、抑制率。由表3.6.1可知,随着酶液用量的增加,空白斜率和农药斜率都呈上升趋势,但是抑制率无明显变化。斜率增大可以增加灵敏度,但是相应的试剂费用也会增加。所以,从灵敏度和试剂费用两者的综合考虑来看,最后还是选择中间那组,即原配方的酶液用量,酶用量为20uL。
    3.6.2 改变底物用量对抑制率的影响
    为了验证是否原配方是最佳的方案,我就尝试着改变试剂包中各种物质的量。原配方是:20uL酶+2.5mL样品+100uL显色剂+20uL底物。接下来就改变底物的用量,分别为10uL、15uL、20uL、25uL、30uL。而样品、显色剂、酶的量不改变,样品是浓度为0.1mg/L的敌敌畏。测得实验数据如下表3.6.2所示。
    表3.6.2 底物用量对抑制率的影响
    底物用量(uL)    △Ao(空白反应3min的变化值)    △At(农药反应3min的变化值)    空白斜率(Ko)    农药斜率(Kt)    抑制率Y(%)
    10    0.098    0.043    0.0327    0.0143    56.12
    15    0.148    0.065    0.0493    0.0217    55.98
    20    0.303    0.131    0.1010    0.0437    56.77
    25    0.417    0.184    0.1390    0.0613    55.90
    30    0.471    0.206    0.1570    0.0687    56.24
        空白斜率、农药斜率、抑制率的计算公式,如P27中3.6.1所示,代入对应的数据即可求得。由表3.6.2可知,随着底物用量的增加,空白斜率和农药斜率都呈上升趋势,但是抑制率无明显变化。斜率增大可以增加灵敏度,但是相应的试剂费用也会增加。所以,从灵敏度和试剂费用两者的综合考虑来看,最后还是选择中间那组,即原配方的底物用量,底物用量为20uL。
    3.6.3 改变显色剂用量对抑制率的影响
    为了验证是否原配方是最佳的方案,我就尝试着改变试剂包中各种物质的量。原配方是:20uL酶+2.5mL样品+100uL显色剂+20uL底物。接下来就改变显色剂的用量,分别为50uL、80uL、100uL、130uL、150uL。而样品、底物、酶的量不改变,样品是浓度为0.1mg/L的敌敌畏。测得实验数据如下表3.6.3所示。
    表3.6.3 显色剂用量对抑制率的影响
    显色剂用量(uL)    △Ao(空白反应3min的变化值)    △At(农药反应3min的变化值)    空白斜率(Ko)    农药斜率(Kt)    抑制率Y(%)
    50    0.295    0.130    0.0983    0.0433    55.93
    80    0.283    0.125    0.0944    0.0417    55.82
    100    0.303    0.131    0.1010    0.0437    56.77
    130    0.288    0.127    0.0959    0.0423    55.90
    150    0.305    0.132    0.1016    0.0440    56.70
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