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    1.3.2 抗氧化活性研究
    1.3.2.1 T-AOC测定
    根据T-AOC试剂盒的方法测定。抗氧化物质能将 Fe3+还原为Fe2+,而 Fe2+能与菲啉类物质形成稳固的络合物,在520 nm下通过比色测出其抗氧化能力的高低。定义在37℃下,为每分钟每毫升抗氧化物质使反应体系的吸光度(A)每增加0.01时,为一个总抗氧化活性单位(U)。各试验重复三个,取平均值。计算公式如下:                          
     
    式中:T-AOC为总抗氧化活性(U/g小米糠);A1为样品吸光值;A0为对照吸光值;V1 为反应液总体积(mL),为3.7 mL;V0为取样量(mL),为0.1 mL;m为稀释倍数,本试验中为10,表示每克小米糠加入10 mL的蒸馏水提取。
    1.3.2.2 DPPH自由基清除能力测定
    用蒸馏水将小米糠粗提液稀释6倍之后,根据Torres-Fuentes等[8]的方法稍作修改测定,取样品溶液2 mL,加入2 mL 的0.1 mmol/L DPPH自由基的95%乙醇溶液,混合摇匀,室温下避光反应30 min。然后用紫外分光光度计在517 nm下测定其吸光值。各试验重复三个,取平均值。样品对DPPH自由基清除能力计算公式如下:
     
    式中:Aa作为样品吸收值;Ab作为空白组(用等量的95%乙醇代替DPPH溶液);Ac作为对照组(用等量的95%乙醇代替样品)
    1.3.2.3 还原能力测定
    还原能力的测定根据Amza等[9]报道的方法,将1 mL的样品溶液和2.5 mL的磷酸盐缓冲液(0.2 M, pH6.6)混合,然后加入 2.5 mL 的1%铁氰化钾溶液,混合均匀,在 50 ℃下保温 20 min。冷水浴降温,之后加入 2.5 mL的 10% 三氯乙酸(TCA)溶液,混合均匀。取2.5 mL的上清液加入2.5 mL的蒸馏水,再加入 0.5 mL的0.1% FeCl3溶液混合均匀,室温下静置10 min,然后用紫外分光光度计在 700 nm 下测量吸光值,吸光值越高说明样品的还原能力越强。
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