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摘要壳聚糖是一种廉价，无毒，生物相容性好的生物大分子，广泛地作为药物载体。叶酸与叶酸受体的结合具有高度亲和性，利用叶酸受体在肿瘤细胞表面过度表达的特点，可将壳聚糖与叶酸偶联，通过叶酸受体的介导作用，达到靶向给药的目的。本课题选择壳聚糖为药物载体，用化学方法合成制备叶酸偶联壳聚糖，用红外光谱验证偶联。用离子交联法制备叶酸偶联壳聚糖纳米粒。以MCF-7肿瘤细胞为实验对象，通过MTT法来评价叶酸偶联壳聚糖的细胞毒性。9877
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关键词：壳聚糖；叶酸；纳米粒；细胞毒性
Title :Study on Preparation and Cytotoxicity of Folate-conjugated Chitosan nanoparticles
Abstract
Chitosan is a inexpensive, nontoxic, biocompatiable macromolecule which has been used as carrier for drug. There is high affinity between folate and its receptor. Using the fact that folate receptor is overexpressed on the surface of tumor cell, we can conjugate chitosan and folate. And through the folate receptor mediated role, the purpose of targeted drug delivery can be reached.
In this research, chitosan was chosen as drug carrier. Chemical merhods was used to prepared folate-conjugated chitosan, and infrared spectroscopy was used to verify couplingand. Folate-conjugated chitosan nanopartiele were prepared by ionically eross-inking method. MCF-7 tumor cell was chosen as experimental subjects, to estimate the cytotoxicity by MTT method.
Key words: chitosan; folate; nanoparticles; cytotoxicity
目 录
摘要 I
Abstract II
1 引言 1
1.1 壳聚糖概述 1
1.1.1 壳聚糖的性质 1
1.1.2 壳聚糖的应用 1
1.2 叶酸及叶酸受体概述 3
1.3 叶酸偶联壳聚糖作为药物载体的研究进展 4
1.3.1 叶酸偶联壳聚糖概述 4
1.3.2 叶酸偶联壳聚糖作为药物载体的研究进展 4
1.4 选题目的与意义 6
2 实验部分 6
2.1 叶酸偶联壳聚糖的制备 6
2.1.1 材料、试剂与仪器 6
2.1.2 壳聚糖的纯化 7
2.1.3 叶酸偶联壳聚糖的制备 7
2.1.4 红外谱图的测定 8
2.1.5 叶酸偶联壳聚糖的纯化 8
2.1.6 叶酸标准曲线的绘制 8
2.1.7 偶联比的计算 8
2.2 细胞毒性实验 9
2.2.1 材料、试剂与仪器 9
2.2.2 细胞的培养 10
2.2.3 细胞的冻存 10
2.2.4 MTT法检测细胞毒性 10
2.3 纳米粒的制备 12
2.3.1 材料、试剂及仪器 12
2.3.2 纳米粒的制备 12
2.3.3 粒径及电位的测定 12
3 结果与分析 12
3.1 产率计算 12
3.2 红外谱图分析 13
3.3 叶酸标准曲线的绘制 14
3.4 偶联比的计算 15
3.5 细胞毒性实验 15
3.6 粒径及电位 16
结论 17
致谢 19
参考文献 20
1 引言
近年来，随着肿瘤成为人类健康的一大杀手，抗肿瘤药物成为现今研究的一大热点。目前，最主要肿瘤的治疗为化疗，即化学药物治疗。但由于大多数抗肿瘤药物的选择性不高、药物毒性大，在杀死肿瘤细胞的同时，也伤害或杀死正常细胞，因此肿瘤药物的靶向性研究越来越受到人们的关注。