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将生香酵母菌菌种充分活化后接入至麦芽汁培养基中,30℃恒温生化培养箱中培养12h,制得种子液;取10g烟粉加入pH值3.5缓冲液100mL,加入纤文素果胶复合酶0.03%(果胶酶:纤文素酶=1:2),在55℃条件下酶解1.5h后高压灭菌处理,冷却后接种生香酵母菌种子液,在30℃,120r/min恒温生化培养箱中培养36h,既得发酵产物。
(3) 乳酸菌+生香酵母菌+根霉菌
用接种环刮取长有孢子的菌丝至有无菌水的三角瓶中加入无菌玻璃珠震荡,取菌悬液稀释不同浓度梯度,分别涂布平板,培养24h,计数,调整孢子液浓度至106个/mL。然后,按50mL/250mL三角瓶装液量,接入孢子液0.5mL,34℃、160r/min震荡培养18h,既得根霉菌种子液;取10g烟粉加入pH值3.5缓冲液100mL,加入纤文素果胶复合酶0.03%(果胶酶:纤文素酶=1:2),在55℃条件下酶解1.5h后高压灭菌处理,冷却后接种生香酵母菌、乳酸菌和根霉菌种子液,在30℃,120r/min恒温生化培养箱中培养36h,既得发酵产物。
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