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    ⒁菜板、无菌刀、培养皿、小试管、试管架、滤纸、煤气灯、酒精棉、纱布、保鲜
    袋等。
    2.2 实验方法
    2.2.1 植物精油微乳液的配制
    植物精油微乳液的配方和制备方法均参考张辉[16,17]
    论文中的实验结果并选取适宜比
    例。以无水乙醇作助乳化剂、吐温-80作乳化剂,先用移液枪按照配方吸取一定量的至试
    管中,再将一定量的精油加入其中,振荡摇匀后,即得微乳液油相;将乳化剂(吐温-80)
    加入到微乳液油相中,使用微波振荡器使其充分混匀,即得精油微乳液原液;用移液枪缓
    慢加水于精油微乳液原液之中,边加水边振摇,将微乳液原液稀释 100倍后,使用微波振
    荡器使其充分混匀,以便于观察现象;每个配方做两个平行。具体配方如下:
    A.  精油5%、助乳化剂(乙醇)5%、乳化剂(吐温-80)90%;
    B.  精油10%、助乳化剂(乙醇)10%、乳化剂(吐温-80)80%;
    C.  精油15%、助乳化剂(乙醇)15%、乳化剂(吐温-80)70%;
    D.  精油20%、助乳化剂(乙醇)20%、乳化剂(吐温-80)60%;
    E.  对照1为蒸馏水。
    2.2.2 植物精油微乳液物理稳定性的考察
    (1) 离心实验
    将按上述方法所配制好的植物精油微乳液于 4000r/min离心30min,静置20min后观
    察现象,考察其物理稳定性;
    (2) 直接观察法
    将按上述方法所配制好的植物精油微乳液于室温下保存,每隔5天观察一次,考察其
    物理稳定性。
    2.2.3 材料处理
    (1) 新鲜苹果的鲜切处理 处理前,将购进的苹果先用 0.1%的次氯酸钠浸泡 5min后,再用自来水冲洗干净,晾
    干。
    在经消过毒的菜板上用无菌刀沿苹果中轴线将其一分为四。
    (2) 不同精油相同比例相同浓度的微乳液对鲜切苹果的抑菌处理
    选用2.2.2中物理稳定性最好的配方比例用来配制四种不同精油微乳原液,并用蒸馏
    水将其稀释至500µL/L。
    将处理好的鲜切苹果分为两组,一组当即进行总菌数(Total viablecount)测定;另
    一组分别浸泡在配制好的微乳液中,3min后取出沥干,分装在标有不同精油名称的保鲜
    袋中,于4℃下贮藏5d后取出进行总菌数(TVC)测定。
    (3) 同一精油不同浓度的微乳液对鲜切苹果的抑菌处理
    选用2.2.3-(2)中抑菌效果较好的精油微乳液种类按其比例配制精油微乳液原液,用蒸
    馏水分别稀释至250µL/L、500µL/L和1000µL/L。纯蒸馏水作对照1,蒸馏水以相同比例
    替代精油所得微乳液原液用蒸馏水稀释至 500µL/L作为对照2。
    同2.2.3-(2),对处理前后的鲜切苹果进行 TVC测定。
    (4) 同一精油不同浓度的微乳液对鲜切苹果的品质测评
    配制同2.2.3-(3)相同梯度的精油微乳液及对照1、对照2,对处理前后的鲜切苹果进
    行品质测评。
    2.2.4 总菌数(TVC)的测定方法
    参照GB 4789.2-2010,将待测定的鲜切苹果切碎,称取 25g于灭菌锥形瓶中,倒入
    225mL0.85%灭菌生理盐水作10倍稀释,经充分振摇后,选择2~3 个适宜稀释度,各取
    1mL稀释液加入无菌培养皿内,在每皿中加入 15~20mL平板计数琼脂(PCA)培养基,
    混匀。待琼脂凝固后,将平板翻转,于 37℃恒温培养箱中培养 48h,菌落记数。每个稀释
    度做3个平行。所有与TVC测定有关的步骤均在无菌环境中操作。
    2.2.5 鲜切苹果的品质测评
    (1) 感官鉴定
    组织食品专业人士 10人,独立评分,依分值统计各等级人数。采用数字化评分方法
    [18]
    对鲜切苹果的感官质量进行分析,实验重复3次,取平均值。感官质量鉴评标准见表
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