1.2.3 培养基及含药培养基的制备
牛肉膏蛋白胨培养基(Beef extract-peptone medium):称取蛋白胨(Peptone) 10 g、牛肉膏(Beef extract)3 g、氯化钠(NaCl)5 g,牛肉膏蛋白胨固体培养基再加琼脂 20 g,加适量蒸馏水溶解,定容至 1000 mL(或 900 mL,预留 10% 体积供加入药液),并用 1 mol/L NaOH溶液调 pH 值(7.0-7.2),分装于试管或锥形瓶中121℃ 高压灭菌20 min。
培养基试管斜面的制备:将配好的营养肉汤培养基摇匀趁热分装于 22 mL无刻度的试管中,每管 4-5 mL,瓶口加棉塞,外包牛皮纸,并用线扎紧,试管口朝上。121℃ 高压蒸汽灭菌 20 min后,取出,30℃ 左右倾斜放置,冷却,待管内培养基完全凝固后即成斜面,备用。来~自^751论+文.网www.751com.cn/
培养基平板的制备:将配好的培养基摇匀趁热分装于 250 mL 三角瓶内,每瓶约 200 mL,瓶口加棉塞,外包牛皮纸,并用线扎紧,121℃ 高压蒸汽灭菌 20 min 后,取出,冷至 50-60℃,在紫外灭过菌的洁净工作台内,摇匀后倒入无菌的 9 cm 培养皿内,每皿 15-20 mL,半开皿盖,通风半个小时左右,直至平板内培养基凝固,无肉眼可见的水滴,合上皿盖,备用。
含药培养基平板的制备:将之前已配好的中药乙醇提取物的水溶液与灭过菌的培养基以 1 : 9 的体积比混合,补足之前的预留体积(空白对照用 5% 的 DMSO 溶液代替中药乙醇提取物的水溶液),趁热摇匀,倒入无菌的 9 cm 培养皿内,每皿 15-20 mL,半开皿盖,通风半个小时左右,直至平板内培养基凝固,无肉眼可见的水滴,合上皿盖,备用