(4)溶胀性测定
取约0.4g膜样品,称重(W2),再将膜完全浸泡在30ml去离子水中,24 h后取出,用滤纸吸干表面多余的水,称重(W1)。溶胀指数由以下公式计算:
溶胀指数= (W1 − W2)/ W2
单位为gH2O/g,所有测试重复三次,取平均值。
式中:W1代表湿态壳聚糖膜表面用滤纸吸干重量(g);
W2代表干态壳聚糖膜重量(g)
2.3.4 壳聚糖膜力学性能的测定
测定方法是根据GB1040-79,测定的力学性质为(1)抗张强度,(2)延伸率,以膜在破裂点的百分伸长率表示。
试样预处理:
a.选取平整、洁净、无缺陷的薄膜,将其裁成 160 mm×10mm 的横条,
b.测厚度,每个试样在标距内测量三点,取其平均值,作为膜的厚度,
c.将试样置于相对湿度为65%±5%的干燥器中,放置在25℃温度条件下,不少于4 h。
拉伸强度按下式计算:δ=P/b . d
式中:P- 最大载荷(kg);b - 试样宽度(mm);d- 试样厚度(mm )。
延伸率按下式计算:E=(G-G0)/ G0
式中: G0:试样原始标线间的距离 (mm); G:试样断裂时标线间的距离 (mm)。
2.3.5红外光谱测定
壳聚糖粉末、精油、壳聚糖单一膜(未中和),壳聚糖单一膜、壳聚糖精油复合膜的红外光谱图由傅里叶变换红外光谱仪(Vertex 70,德国布鲁克公司),在衰减全反射模式下测试,扫描次数32,扫描范围600 to 4000 cm-1,分辨率4 cm-1。
2.3.6X射线测定
壳聚糖粉末、壳聚糖膜(未中和)、壳聚糖膜、壳聚糖薰衣草精油共混膜的XRD的图像用X射线衍射仪(D2 PHASER,德国布鲁克公司)测得。并用Jade6.5软件分析数据。
计算结晶度的公式如下:
结晶度=衍射峰面积/总峰面积
测试条件: Cu Kα(λ = 1.54 Ǻ)灯,测试电压40 kV ,测试电流40 mA.扫描速率4°min-1,扫描范围2θ=10-60°。
2.3.7抑菌性实验
将营养琼脂溶于蒸馏水,配制成液体培养基,用NaOH 溶液调节pH 值至7. 0 左右。培养基经121 ℃高温灭菌后备用,将复合膜制成直径为14 mm 的圆形样品,紫外灭菌30 min 备用。将营养琼脂进行到平板,对40个培养皿进行编号,至冷却凝固。将试管培养的大肠杆菌种加入5毫升无菌水,用接种环将其溶在无菌水中,用移液管移取1毫升倒入1号试管中,加入9毫升无菌水,待其混合均匀后,从2号试管移取1毫升倒入3号试管中,然后加入9毫升无菌水,以此类推到6号试管。用2号试管中的大肠杆菌菌种进行用0.1毫升的移液管各移取0.1毫升到1-14号培养皿中,用接种环进行涂布,然后将准备好的壳聚糖单一膜和壳聚糖-薰衣草精油复合膜的样品放到培养皿中,其中1号样品为不加氢氧化钾中和的壳聚糖单一膜,2号为加氢氧化钾中和的壳聚糖单一膜,2-5号样品为精油量为壳聚糖量的2%,4%,6%,8%,10%,每个膜样品分别放入到两个培养皿中,为1-14号培养皿,另外15与16号培养皿只用4号试管中的大肠杆菌移取0.1毫升,只进行涂,不加入样品。同样17与18号培养皿用5号试管中的大肠杆菌涂布,19与20号培养皿用6号试管中的大肠杆菌进行涂布。15-20号培养皿中用作计数菌种,进行抗菌性分析。最后,将上述20个培养皿放到37摄氏度的生化培养箱中,培养24小时之后,将其取出,放在紫外灯下将其杀死,然后观察聚糖单一膜和壳聚糖-薰衣草精油复合膜的抗菌性,分析抗菌性强弱因素。[14]
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