3.2蛋白质修饰反应体系模型
蛋白质修饰的模型系统是根据朱,钱的方法[14]进行研究的。BSA (1 mg/mL) 与一定量的鱼油在PBS (0.01 M, pH 7.4) 中进行孵化,助溶剂为吐温20,催化剂FeSO4/ ascorbic acid,葡萄籽提取物(GSE)的最终浓度分别为25,50,100,200 ppm。孵化在37℃下进行72小时。
样品试剂的配制:
葡萄籽提取物(Grape seed extract,GSE)受试液的配制:精确称取葡萄籽提取物
20 mg溶于1ml70%乙醇中,配成20000ppm的母液备用。
Fish oil 母液:取40mg吐温-20,20µl鱼油加入10mlPBS,混匀。BSA母液:2mg/ml。
VE反应液的配制:精确称取2mgVE溶于0.2ml70%乙醇,配成10000ppm的溶液备用。
催化剂(FeSO4.7H2O)的配制:精确称取2.1mg FeSO4•7H2O溶于15ml PBS。准确称量17.6mg的Vc并将其溶入10ml的PBS。(即配即用)