故本实验决定采用顶空固相微萃取-气相色谱质谱法。
(1)顶空固相微萃取
顶空固相微萃取(Headspace Solid-phase microextraction,HS-SPME)最近快速发展起来的一种新技术。具有操作简单,灵敏性高,需要的样品量少,成本低等优点,对极性和非极性,液体样品和固体样品都可以应用,并且可以和GC,GC-MS,HPLC,LC-MC,GC-O等仪器联用。
(2)气相色谱-质谱联用
气相色谱是以惰性气体作为流动相,选择表面积大的活性吸附剂作为固定相。作用机理是,由于吸附剂对不同组分吸附能力不同,因此,当混合样品进入色谱柱后,经过一定时间,各组分在色谱柱中速度也不同。最容易解析的是吸附力弱的组分,最先离开色谱柱进入检测器,同理,吸附力越强的组分越不容易被解吸下来。如此这般,各组分在色谱柱中逐渐分离开来,检测器详细地检测并记录各组分的顺序。
气相色谱-质谱联用是将气相色谱和高分解能质谱仪直接连结而成,它能将从GC中得到的离子准确测定到万分之一测定单位并得到分子式。这种方法是进行定性定量分析,控制香精成分的一种比较好的方法,此法操作简便快捷,达到了香精品质控制的要求,能较好的对香精中主要香气成分进行分析测定,且重复性高。文献记载,Aliferis等[14]为鉴别蜂蜜产地、蜜源,采用基于固相微萃取的GC-MS提取了蜂蜜挥发性组分,同时发现能够通过GC-MS检测到蜂蜜中的特征物质。
可与顶空固相微萃取联用,测定蜂蜜中的香气成分组成。
1.3.4 嗅觉指纹图谱的构建方法
为从嗅觉方面区别不同种类蜂蜜,需构建不同蜂蜜的嗅觉指纹图谱。构建嗅觉指纹图谱主要应用为电子鼻。模式识别、信号预处理和气敏传感器阵列是电子鼻的主要部分。传感器表面的活性材料与气体发生反应,将传感器的化学信号转换成电信号,一种气的电子鼻响应谱图就是由各个传感器的响应信号组成的。由于气中的各种化学成分均会与传感器上的活性材料发生反应,因此这种响应谱图是该气的广谱响应谱。同时,将传感器的信号进行适当的预处理(信号放大、特征提取、消除噪声等)后,采用适宜的模式识别分析方法对其进行处理,可以对气进行定性定量分析。理论上,不同气具有其特有的响应谱,因此,根据其特征响应谱可以确定出不同的气。此外为实现混合气体定量、定性分析,可以利用气敏传感器构成阵列来测量多种气体的交叉敏感性。
电子鼻是一种新颖的分析、识别和检测复杂嗅和挥发性成分的人工嗅觉装置。它是根据仿生学原理制成的。电子鼻得到的不是被测样品中某种或某几种成分的定性或定量结果,而是样品中香气组分的整体信息,也称“指纹”数据,这是它与其他化学分析仪器的不同之处。目前国内外已将电子鼻成功应用于食品、医学、环境、航天等领域;在食品检测方面,主要应用于饮料、调料和酒类等的质量分级和区分鉴别[15]。裴高璞等为建立蜂蜜掺假快速检测方法,利用电子鼻并结合主成分分析数据处理方法研究了掺入10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%油菜蜜和大米糖浆的掺假蜂蜜的电子鼻信息变化特征,结果表明,掺假蜂蜜的电子鼻信息呈现线性变化,并且电子鼻对掺假蜂蜜有较强的敏感力[16]。
1.3.5 蜂蜜蜜甜香韵的感官分析
蜂蜜蜜甜香韵的感官分析采用感官评定的方法。近些年来,作为一门新型的学科,食品感官评定科学是在传统的食品感官鉴评和食品感官分析的基础上发展起来的,它有着理论性、技能性及实践性相结合的特点。它在食品研究中具有先导作用,以其对食品贮藏、加工、运销,食品质量改良,食品生产工艺革新,食品包装改进,以及对食品原料深加工和综合利用等具有的重要价值,逐渐发展成为食品科学与工程类专业的重要扩展课程。虽然这门学科在西方已有80多年历史,但目前这门学科在我国仍处于起步阶段,课程教学和人才训练薄弱,研究队伍零散,与国外有着不小的差距。
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