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1.4 中药多糖提取分离方法
(1)水煎煮法
水煎煮法是多糖提取的传统方法,是用水作为溶剂煎煮提取多糖。因为多糖在冷水中溶解度较低,一般要在70-90℃热水中回流提取2～3h,将提取液真空浓缩后加入乙醇将多糖析出目前多数国内文献采用水煎煮法提取多糖如盛家荣等采用此法从板蓝根中提取多糖,李志洲【4】等采用该法提取大枣多糖。该法具有设备简单、操作方便、适用面广等优点。但是这种方法也存在操作时间长，收率低，并需多次反复操作，能耗较高等缺点。黄琳娟【5】等人研究枸杞多糖时采用水提法先浸泡24h,过滤后残渣再用水浸泡6h,操作周期过长。
(2)酶法提取
酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术,使用酶可降低提取条件。在比较温和的条件下分解植物组织,加速有效成分的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等非目的产物。此法可使后续的浓缩和脱蛋白工艺更简易、省时，粗多糖的纯度更高。但会提高生产成本,对提取条件要求较高。杨云【6】等人采用的单酶法和复合酶法提取大枣多糖,单酶法提取多糖含量最高可达44.69%,而复合酶法多糖最高含量可达68.13%。
(3)超声法提取
超声法是利用超声波对细胞组织的破碎作用来提高多糖浸出率的，具有快速、安全、简便、成本低、多糖提取率高,成分又不被破坏等优点,但对提取设备要求较高。李夏兰【7】等采用超声法提取芥菜多糖。研究表明,超声法与传统的热水浸提法相比,多糖提取率高,并有效地缩短了提取周期,提高了产品质量。
(4)微波法提取
微波法提取是利用微波能来提高萃取率的一种最新发展起来的新技术。它的原理是在微波场中,吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使得被提取物质从基体或体系中分离,进入到介电常数较小、微波吸收能力相对差的萃取剂中;微波提取法具有设备简单、适用范围广、提取效率高、重现性好、节省时间、节省试剂、污染小等特点。目前,除主要用于环境样品预处理外,还用于生化、食品、工业分析和天然产物提取等领域。
(5)超临界萃取法
根据某些气体在超临界状态下具有特殊的液相性质,对一些组分有较好的溶解性,用来提取目的产物。一般采用CO2超临界萃取多糖组分。廖周坤【8】等人采用超临界CO2萃取技术对藏药雪灵芝中多糖进行提取。结果表明。采用不同极性夹带剂的超临界CO2萃取与传统溶剂萃取工艺相比多糖收率可提高至1.62倍。这种方法对物质的生物活性保存较好,但成本较高,大多用于价值较高的多糖的提取。
1.5 多糖的纯化
活性多糖的分离纯化是指获得粗的活性多糖后，除去共存杂质，得到纯度较高多糖产品。分离纯化的方法很多，一般随多糖组成的不同而有所区别。
(1) 透析法
透析法是利用一定孔目的膜，使无机盐或小分子糖透过，而将大分子的多糖截留下来从而达到纯化多糖的目的。此法的关键是要选择孔目合适的透析膜。纤文膜孔径为2～3nm,可使单糖分子通过,分离效果较好,透析时常需要多次换水,溶液的pH值文持在6.0～6.5范围内。