产胞外多糖细菌菌株的筛选鉴定

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摘要：微生物多糖大多具有良好的流体力学性质，应用于工业生产的前景很好。本实验从自然界采集花瓣样品，筛选可以产胞外多糖的细菌菌株，对其进行16SrDNA测序，并对其多糖产物进行相关性质的探索。筛选菌株用的是涂布平板法，扩大培养用的是震荡培养法，测糖含量用的是DNS法。经筛选，最终得到5株高产胞外多糖的细菌菌株：1号、4号、10号、17号和19号。分别对其进行PCR扩增、切胶回收并测序。此外，对其产物多糖的一些性质进行了探索，包括多糖含量、多糖的溶解性和多糖的黏度等。64759

毕业论文关键词细菌多糖菌株筛选 16SrDNA 黏度

毕业设计说明书（论文）外文摘要

Title Screening and identification of polysaccharides-synthesizing bacteria

Abstract

With nice properties, microbial polysaccharides have great prospect in industrial production. This paper was aimed at gathering samples of flowers from the nature; screening bacterial strains which could produce extracellular polysaccharide. Then we did 16SrDNA sequencing to them, and explore the related properties of the polysaccharides product. Spreading plate method was used in screening of strains; shocking method was used in expanding the cultivation and DNS method was used in sugar content measurement. After screening, three strains which have high yield of extracellular polysaccharide were identified and selected for the optimization of fermentative medium: number 1, 4, 10, 17 and 19. Respectively, we did PCR amplification and sequencing with them. In addition, we explored some properties of the polysaccharide product, including polysaccharide, polysaccharide solubility and viscosity, etc.

Keywords bacterial polysaccharides screening 16SrDNA viscosity

1 绪论 1

1.1 多糖简介 1

1.2 多糖的性质 1

1.3 多糖的应用现状和临床作用 6

2 实验内容与方法 8

2.1 实验材料 8

2.2 菌种的分离纯化 10

2.3 菌株形态学观察 11

2.4 细菌样品整DNA的提取 11

2.5 16S rDNA的PCR扩增纯化及其序列的测定 11

2.6 细菌产糖的糖含量测定和性质测定 14

3 实验结果与分析 16

3.1 糖含量的测定 16

3.2 糖性质的测定 17

结论 19

致谢 20

参考文献 21

1 绪论

1.1多糖简介

多糖（polysaccharide）是糖苷键结合而成的糖链，是由单糖组成的聚合高分子碳水化合物。由相同的单糖单元组成的多糖称为同多糖，例如淀粉、纤维素；以不完全相同的的单糖单元组成的多糖化合物称为杂多糖，如阿拉伯胶。多糖是糖苷，可以水解，水解过程中，往往会产生一系列中间产物，最终会完全水解得到单糖[1]。多糖是由多个单糖单元缩合、失水而成，是一类分子结构复杂的物质。由同一种类型的单糖组成的糖类物质有葡萄糖、半乳聚糖、甘露聚糖等，由两种以上的单糖所组成的杂多糖有糖胺聚糖等，化学结构多样。