2.实验材料和仪器
2.1 实验动物
实验动物中国石龙子于2014年4月下旬采自浙江丽水三岩寺,均为性成熟个体。中国石龙子被饲养在长×宽×高=60cm×44cm×36cm的塑料箱中,箱底铺约5cm的松软细土,60%的土层上覆盖草皮与泡沫蛋壳。保持饲养箱内30%的沙土湿润,供应充足的水与面包虫,室温恒定22℃,12h光照,12h黑暗。挑选性成熟雄性个体2只,断头处死动物后,迅速剖取精巢,肝脏,肺,脾脏,心脏,肌肉及肾脏放-80℃冰箱保存,以备后续实验使用。
2.2 实验相关试剂以及试剂盒
仪器 生产公司或品牌
水平摇床 上海一恒心
凝胶成像仪 Tanon-4200
PCR扩增仪 LonGene MG96
超微量核酸蛋白测定仪 ND2000基因有限公司
生化培养箱 中科美菱YC-260L/YC-300L
超净台
微波炉 上海博讯实业有限公司
格兰仕WBBH1012
纯水仪 上海和泰仪器有限公司
生化摇床 华利达HZ-2411K
冰冻切片机 美康HM550VP
移液器 Eppendorf
组织匀浆器 德国IKA
多聚赖氨酸载玻片 Corning,USA
低温离心机 Sigma S3K15
常温离心机 Eppendorf
核酸电泳槽和电泳仪 Tanon EPS300
冰箱 Siemens
恒温水浴锅 基玮DK-S24
干式恒温器 杭州奥盛仪器有限公司 MK-10
电泳仪 Tanon-EPS 300
荧光定量PCR仪
光学显微镜
激光共聚焦显微镜 CFX96 Bio-Rad
Olympus BX51
Carl Zeiss LSM-710
试剂 购买公司或品牌
超纯RNA提取试剂盒 康为世纪
凝胶回收试剂盒 康为世纪
X-gal 上海生工
IPTG 上海生工
DNA green 天恩泽基因科技公司
PCR试剂盒 全式金公司
PrimerscriptTM First-strand cDNA Synthesis Kit TaKaRa公司
SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit
超快核酸电泳液 Clonetech公司
天恩泽基因科技公司论文网
氯仿 Abcam公司
引物
SYBRR Premix Ex TaqTM 上海生工
TaKaRa
不同浓度的酒精 国药集团化学试剂有限公司
多聚甲醛 上海生工
OCT包埋剂 Sakara
蔗糖 Sigma
牛血清白蛋白 Sigma
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 碧云天