1.1.6包埋率测定方法
测定脂质体包埋率的方法可以分为:(1)直接测定法;(2)将游离药物与脂质体分离之后再测定。经常使用的测定方式是经过透析、柱层析或者离心等步骤分离后,分开测定游离样品和脂质体内的样品量,计算包埋率。常用的层析柱是葡聚糖凝胶柱,还有琼脂糖凝胶柱,利用脂质体和游离样品相对分子质量的差异性分离,然而存在洗脱时间过长、洗脱体积大、药物浓度低等不足[12]。Fry率先报道了一种方法,葡聚糖微型凝胶柱快速测定包埋率,极大地减短常规柱所需分离的时间,于是得到了广泛的应用。在微型凝胶柱的洗脱条件进行不断优化后,洗脱时间可从1~ 2 h缩短到约6min;对相对分子质量大的生物药物,常规的柱层析分离会使得洗脱峰重叠,改进的方法是在低流速下使用柱,TSK-G6000、TSK-G5000、等HPLC柱分离[13]。因为分离的过程总极可能破坏脂质体或者发生脂质体渗漏的情况,近年来发展了相当多不经分离直接测定的方法,比如通过荧光染料钙黄绿素的荧光淬灭反应测定包埋率,此种方法是利用钴阳离子的加入,未包埋的钙黄绿素产生荧光淬灭的现象间接指示包埋率。电子自旋共振光谱(ESR)可以测定包埋率,添加顺磁性试剂壁如铁氢化物时,外部标记物的电子自旋谱带会明显加宽。还能够利用包裹于脂质体内部的标记物和游离标记物间扩散系数的差异性测定包埋率大小[12]。
1.2 本课题的研究目的和意义
天然功效化妆品的定义是使用精细化工以及生物化学技术,提取天然原料,该原料具备独特功能和生物活性。原料可以是中草药、动物器官、海洋植物或者微生物等) ,随后将该原料运用化妆品中发挥其相应功效。
21世纪初,中国化妆品市场的不断扩大,经济高飞速增长,无数跨国公司和本土化妆品公司将大量的精力和关注投入到天然化妆品部分,从而吸引不同阶层消费者。中国消费者对含有天然原料护肤产品的热爱度不断的增加,使得植物来源的美容化妆品对传统产品产生了巨大的冲击。这一现象使得化妆品行业需要推出得到广泛认可的对于"天然”的一个定义。购买者普遍会持有含有天然植物提取物护肤品比含有合成化学成分的产品更加利于人体健康的观点,所以消费者理所当然地更加钟爱含有植物提取物的产品。然而消费者面临现实问题是植物提取物的成本远远高于合成化学品,并且不易于纯化和行业内的标准化。近年来,油价上涨,绿色化学的发展迅速,相应促进了化工企业将重点转移到植物为基础的原材料的发展。所以,辅酶Q10提取技术和在化妆品中的合理应用也是符合当下化妆品的发展潮流。包覆技术在辅酶Q10的应用中也扮演了极为重要的角色。