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    2  材料和方法、

    2.1  材料

    2.1.1  原料
    紫山药干粉;新鲜紫山药;薯蓣皂甙标准品(中国药品生物制品检定所)
    2.1.2  实验试剂
    本实验所用试剂见表 2.1
    表2.1 实验试剂
    实验试剂    试剂纯度    厂家
    95%乙醇    分析纯    国药集团化学试剂有限公司
    甲醇    分析纯    国药集团化学试剂有限公司
    石油醚(60-90)    分析纯    国药集团化学试剂有限公司
    香草醛    生化试剂    国药集团化学试剂有限公司
    无水乙酸    分析纯    国药集团化学试剂有限公司
    高氯酸    分析纯    国药集团化学试剂有限公司
    D101树脂    生化试剂    国药集团化学试剂有限公司

    2.1.3  实验设备
    本实验使用的设备见表2.3所示:
    表2.3 实验设备
    实验设备    厂家
    MP200B型电子天平    上海精科实业有限公司
    HWS12电热恒温水浴锅    上海恒科仪器有限公司
    TGL-16G型台式离心机    上海飞鸽机械公司
    DZF_6090型真空干燥箱    上海一恒科技有限公司
    直行冷凝管    上海禾汽玻璃仪器有限公司
    高效液相色谱仪    
    721型可见分光光度计    上海菁华科技仪器公司


    2.2  实验方法
    2.2.1  试剂的配置[34]
    2.2.1.1  薯蓣皂甙对照液
    称取薯蓣皂甙对照品5.0mg,加甲醇溶解,转入50mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。
    2.2.1.2  5%的香草醛冰醋酸液
    称取0.50g香草醛,溶解于10mL冰醋酸中。
    2.2.1.3  乙醇溶液
    将乙醇配制成体积分数分别为55% ,65%,75%,80%,85%,95%的溶液。

    2.2.2  薯蓣皂甙标准曲线的绘制[34]
    分别移取薯蓣皂甙对照液0,0.4、0.8、1.2、1.6和2.0 mL置于具塞试管内,挥干溶剂,再分别加5%香草醛一冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL,混匀、密塞,置6o℃恒温水浴中显色15 min,取出后立即以冰水冷却5 min,各加入冰醋酸5.0 mL,摇匀,静置10 min,以试剂空白为参比,用uV一722型分光光度计于波长544 n处测其吸光度[33]。以薯蓣皂甙质量m为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制薯蓣皂甙标准曲线。

    2.2.3  紫山药的干燥工艺[34]
    山药一洗涤一去皮切片一护色一低温一干制一冷却包装。
    (1)紫山药的洗涤:选取无腐烂,无霉变斑点的新鲜山药,用流动的水冲洗干净其外部的泥土、沙粒等。
    (2)去皮切片:用刀去皮后,迅速切成2 3mm厚的薄片。
    (3)护色:将切好的紫山药片快速浸入护色液中(护色液的成分比为柠檬酸:无水氯化钙:蒸馏水为0.2% :0.2% :1),使山药充分浸渍,不要露出到空气中,护色1 h。
    (4)干制:将紫山药片铺摊在有筛眼斜盘上,送入干燥箱中,干燥温度在45℃左右,干制初期注意排除湿气和避免表面硬化,干制后期要注意温度,避免焦化。
    (5)冷却,包装。

     2.2.4   乙醇提取皂甙工艺
    (1)提取:称取3g干燥山药粉3份,置于3个250 mL的锥形瓶中,然后向其中加入一定体积、不同质量分数的乙醇溶液,摇匀。在不同的温度下,回馏提取一定的时间,冷却后用布氏漏斗过滤。
    (2)脱脂:加入5ml蒸馏水溶解,然后用石油醚脱脂2次,取水层。
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