1.4.2纤文素酶酶解时间确定 4
1.4.3纤文素酶酶解pH的确定[5] 4
1.4.4木聚糖酶酶添加量的确定[6] 4
1.4.5酶及超声辅助酶水解[7-9]脱脂质、淀粉、蛋白质小米糠提取AX的方法选定 4
1.5去除阿拉伯木聚糖粗提物中的杂蛋白 5
1.5.1 AX提取液的处理 5
1.5.2脱蛋白处理 5
1.6 AX、蛋白质、总糖测定的方法 6
1.6.1 AX的测定方法 6
1.6.2 蛋白质测定的方法 6
1.6.3 总糖测定的方法 7
2 结果与分析 7
2.1 小米糠细度的筛选 8
2.2 脱脂小米糠料液比的筛选 8
2.3 纤文素酶、木聚糖酶酶解小米糠最佳条件 8
2.3.1纤文素酶酶解温度的确定 8
2.3.2纤文素酶酶解时间确定 9
2.3.3纤文素酶酶解pH的确定 9
2.3.4木聚糖酶添加量的确定 10
2.3.5 酶水解脱脂质、淀粉、蛋白质小米糠提取AX的方法选定 10
2.3.6 超声与纤文素酶-木聚糖酶复合处理提取AX的方法的选定 11
2.4去除阿拉伯木聚糖粗提物中的杂蛋白 11
3 结论 12
致谢 12
参考文献 13
小米糠中阿拉伯木聚糖的分离提取研究 大量的研究表明,AX对面制品的加工品质具有重要影响,同时还具有降血脂、减肥、免疫调节等生理活性。AX大量存在于谷子细胞壁中,而中国的北方是谷子的主要产地。研究从小米糠中提取AX能使小米糠资源得到充分的利用。根据AX的理化性质及相关的AX的分离提取研究可知,阿拉伯木聚糖主要分为水溶性阿拉伯木聚糖和水不溶性阿拉伯木聚糖,水溶性阿拉伯木聚糖在小米糠中含量较少,主要通过水提取的方法提取[1]。水不溶性AX含量较多,但其与各种单糖和纤文素的组合形成的支链聚合物,主要通过酶解法和超声辅酶水解的方法提取。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1试验材料
小米糠,山西省市购;
1.1.2主要试剂
耐高温α-淀粉酶(≥4000(U/g),生化试剂,购买自北京日光生物科技有限公司;糖化酶(≥100U/mg),中性蛋白酶(>50µ/mg),生化试剂,购买自上海瑞永生物科技有限公司;纤文素酶(10000U /g),生化试剂,购买自阿拉丁公司;木聚糖酶(6000U /mg),生化试剂,购买自源叶生物;硅藻土,地衣酚,苯酚,分析纯,购买自上海瑞永生物科技有限公司;Bradford试剂,牛血清蛋白,分析纯,购买自国药集团化学试剂有限公司。
1.1.3主要仪器设备
pH计,购买自奥豪斯仪器有限公司;电子天平cp313,奥豪斯仪器有限公司;SHZ-88A往复式水浴恒温振荡器,常州诺基仪器有限公司;Eppendorf台式高速冷冻离心机 5804R,广州安邦生物科技有限公司;SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵,上海予正仪器设备有限公司;GZX-9240MBE电热鼓风干燥箱,扬州培英实验仪器有限公司;紫外分光光度计,SHIMADZU。
1.2 小米糠的脱脂处理
(1)小米糠经充分研磨,过20目筛。
(2)按1:2.5的料液比(g/mL)加入正己烷,于55°C水浴振荡器中反应2 h后弃上清,如此重复三次。
(3)将脱脂后的小米糠置于通风厨中,待正己烷挥发完全即得到脱脂小米糠,于冰箱-20°C冷冻保存。
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