目前,对于重金属污染所采用的修复手段包括:工程修复、电动修复、电热修复、土壤淋洗以及化学修复,这些方法虽然在一定程度上能够缓解重金属污染,但是却存在着一些弊端:如实施工程量大、投资费用高,破坏土体结构,引起土壤肥力下降,并且还要对换出的污土进行堆放或处理,其中化学修复只是改变重金属的存在形态,并不能彻底根除,还存在再度活化污染的可能。另外,通过一些特定植物对金属离子的提取、挥发以及稳定等特性也可以进行重金属污染修复。这种生物修复方式由于效果好、易操作等特点已经收到越来越多的重视。但是却只是用于非耕作土壤或水体的修复,对于农田重金属污染依然无能无力[5]。
利用自然环境中分离得到的有益微生物来修复农田及水体的重金属污染就可以克服这一困难[6]。受到重金属污染的土壤,往往富集多种耐重金属的真菌和细菌,微生物可通过多种作用方式影响土壤重金属的毒性[7-8]。如魏本杰等人报道,产铁载体细菌可以活化土壤中的镉[9]。周小梅等人也报道了一株具有较强产酸能力的芽孢杆菌,该菌株除对镉有耐性之外,对铅、铜等均具有一定耐受性[10]。除此之外,植物内生菌作为与植物关系紧密的重要微生物资源,也有研究人员研究其在修复重金属污染中的作用。如曹喆等人从重金属镉(Cd)超累积植物龙葵中分离到一株芽孢杆菌能够去除镉离子[11]。另外,姜敏等人报道从重金属富集植物(大叶相思)与非富集植物(水禾、水稻)中分离的重金属抗性真菌均高于根际真菌[12],也说明了内生菌在在重金属修复中的巨大潜力。以往报道中对于镉污染的微生物修复侧重点在于土壤中镉的活化,然后通过微生物-植物进行联合修复,但是该方法在耕地重金属修复中却存在一定弊端。因此,寻找一种能够有效降低环境中镉离子浓度从而减少农作物吸收积累的修复方式,对于日益严重的耕地重金属污染来说意义重大。来.自/751论|文-网www.751com.cn/
本研究旨在通过离体条件下菌株耐受镉离子活性筛选,选择能够耐受并且降低环境中镉离子浓度的菌株进行温室评价实验,并且探讨其降低镉离子浓度的机制。旨在寻找一条能够降低农业生产中镉污染危害的途径。
2 材料与方法
2.1 离体条件下菌株耐镉活性检测
将活化后的菌株接种到含有终浓度为15mg/L硫酸镉的LB培养液中(培养液配制用水为去离子水),28℃,180 rpm摇床培养24h。分别从培养后的培养液中吸取2mL 在600nm 下检测其吸光值,以此判断菌株生长情况。另取1mL 培养液离心后取上清液进行消化用以测定其中镉离子浓度,消化方法如下:1mL 上清液中分别加入9mL 去离子水,转移至50mL 小烧杯中,加入浓硝酸1mL,80℃水浴,蒸发至1mL左右再加入浓硝酸1mL、高氯酸0.5mL。混匀后继续水浴蒸发至1mL,冷却,加入4mL去离子水,混匀后利用原子发射光谱法(ICP)测定其中镉离子浓度。