分析天平:岛津AUY120,SHIMADZU
玻璃点样毛细管:内径0.3mm,管长100mm,华西医科大学仪器厂生产
硅胶板:GF-254,青岛海洋化工厂分厂
铁架台、试管、圆底烧瓶、漏斗、研钵等
材料:植物来源:产自安徽亳州药材市场,经天津中医药大学李天祥教授鉴定为百合科菝葜属植物牛尾菜(Smilax riparia A. DC.)
试剂:蒸馏水;甲醇、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯,均为分析纯,经旋蒸后使用;浓硫酸论文网
色谱填料:大孔树脂,HPD-600;硅胶100-200,200-300目,青岛海洋化工厂分厂;葡聚糖:SephadexTM LH-20,Sweden;反相C18填料:GHODSAI12S50,加拿大
2.2 实验步骤
称取10kg干燥的牛尾菜根茎,分批倒入5L的圆底烧瓶中,用95%的工业乙醇加热回流提取,煮3次,每次1小时。用纱布蒙住圆底烧瓶瓶口,倒入另一容器中,真空旋转蒸发后得到600g乙醇浸膏,倒入装有大孔树脂的漏斗中,用4L的水冲淋,之后用乙醇进行解吸附,得粗提物1。先后用乙酸乙酯、甲醇对其进行萃取,得到乙酸乙酯部分77.6g,甲醇部分126.2g。乙酸乙酯部分用CH2Cl2:CH3OH(19:1)作为洗脱剂,过正相硅胶柱,分离下来以后,通过点样进行跑板后,分为17段;甲醇部分用150g 100~200目硅胶进行拌样,置于漏斗中,先后用CH2Cl2(2L), CH2Cl2:CH3OH(49:1, 1.9L), CH2Cl2:CH3OH(39:1, 9.4L),CH2Cl2:CH3OH(29:1,9.8L),CH2Cl2:CH3OH(19:1, 14.95L),CH2Cl2:CH3OH(9:1, 38.79L),CH2Cl2:CH3OH(5:1, 20.5L)洗脱,用500ml瓶子依次分装,点样,合并成4段