现在萃取多糖的方法大多是热浸提法,微波提取法。提取率不高。而利用超声微波协同萃取冬枣多糖的相关研究报告还未见报道,此种可有效提高提取率,缩短提取时间,节约成本,甚至还可提高产品质量和产量,具有很高的研究价值,所以本文着重研究了这项技术在萃取冬枣多糖方面的工艺的优化。
2 实验材料、仪器与试剂 源]自[751^`论\文"网·www.751com.cn/
冬枣购于江苏省师范学院边炫彩果品。
CW-2000型超声-微波协同萃取仪(上海新拓微波溶样测试技术有限公司);SHB-111型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);RE-2000型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);UV-9100型紫外可见分光光度计(北京赛多利斯分析仪器公司)、台式离心机(上海安亭科学仪器厂制造)、电子分析天平(上海精科天美科学仪器有限公司)、恒温水浴锅(南京创睿仪器制造有限公司)、80目筛(江苏省南京市雄晨筛网厂)。
葡萄糖;无水乙醇;石油醚(30~60℃);浓硫酸;蒽酮均为分析纯。
3 实验方法
3.1 冬枣的预处理
将市场上买回的冬枣洗净后切片去核,放入烘箱中以105℃杀青15min,再以60℃的温度烘干至恒重。取出后用粉碎机粉碎,过筛,得到冬枣样品粉末备用。
将冬枣粉末置于回流提取装置中,用30~60℃沸程的石油醚脱脂3h,过滤,抽滤后弃滤液,烘干。用80%浓度的乙醇回流2h,过滤,抽滤后弃滤液,并干燥固体物,得到除杂质的冬枣粉末。
3.2 样品溶液的制备和多糖提取量测定
称取1g冬枣粉末干燥品,然后加一定量的蒸馏水,置于超声-微波协同萃取仪中提取。萃取过后的料液取进行4500r/min的的离心速度离心10min,得取上清液,定容到25mL的容量瓶中,取0.1mL的定容瓶内的液体,用200ml的蒸馏水稀释,然后用移液枪取1mL被稀释的液体到具塞试管中,再加入4mL蒽酮硫酸溶液(0.2g/L),立刻将试管塞紧并放入冷水中。随后热水浴10min,取出冷却后在620nm已调零的分光光度计下测吸光度。
4 冬枣多糖含量的测定
4.1标准曲线的制作
4.1.1 蒽酮-硫酸溶液的配制
称取 0.2 g 蒽酮,加 100mL浓硫酸,置于棕色瓶中,混合摇匀置于冰箱中(现配现用)[8]。
4.1.2 葡萄糖溶液的配制
精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品20mg,加蒸馏水溶解,定容与100mL容量瓶中,配成0.2g/L的葡萄糖标准液。分别精密吸取1、2、3、4、5mL至于10mL容量瓶中,以蒸馏水定容摇匀,得系列对照品溶液[9]。
4.1.3 标准曲线的制作
精密吸取上述系列对照品溶液1.0mL,分别至于10mL具塞试管中。将试管至于冰水中,在冰水中分别向试管中加入0.2%蒽酮-硫酸溶液4mL。待各管加完后同时摇匀,置于沸水浴中准确加热10min,取出用冷水迅速冷却至室温,放置10min,于620nm处测得吸光度。另精密吸取蒸馏水1.0mL,同法操作,作为空白对照[9],