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摘要： 随着基因工程技术的研究和发展，转基因农产品的市场化趋势已越来越明显，国家也采取相应措施对转基因产品加以管理。目前对转基因产品外源基因的检测多集中在启动子、终止子、目标基因和标记基因上，本文以转基因水稻为研究材料，通过使用常用的PCR技术对待测样品进行定性和定量检测分析，从而判断该待测样品中是否含有目标基因。59427
毕业论文关键词： 水稻 转基因 定性检测 定量检测
Abstract: Rising of genetically engineered technology, the market trend of Transgenic Agricultural Products has become more and more obvious, the country also take corresponding measures to regulate genetically modified products. At present the detection of transgenic products of exogenous genes and more concentrated in the promoter, terminator, and target gene and marker gene. In this paper, transgenic rice was used as research materials. We made a qualitative and quantitative detection by using fluorescent PCR technology commonly used in the sample to be measured, and thus the sample to be measured is the presence of the exogenous gene of qualitative and quantitative analysis.
Keywords: Rice, Transgenic, Qualitative detection, Quantitative detection
目录
1 前言 4
2 材料与方法 4
2.1 材料 4
2.2 试剂与耗材 5
2.3 仪器设备 5
2.4方法 5
2.4.1 DNA的提取与纯化 5
2.4.2 引物序列 5
2.4.3 PCR 检测 6
3 结果分析 7
3.1定性PCR检测 8
3.2荧光定量PCR检测 8
结论 ...10
参考文献 11
致谢 12
1 前言
自1983年世界上首例转基因作物--转基因烟草问世以来，转基因作物已获得了长足发展。到目前为止，全世界已有25个国家开始转基因农作物的种植，世界各国已试种的转基因植物超过4500种，已批准商业化种植的转基因品系已超过100余种[1]。不久前，ISAAA在北京公布最新全球年度生物技术作物种植面积报告。报告显示，目前有1800多万农民在1.75亿公顷的土地上种植生物技术作物。
目前，玉米、水稻等是主要种植的转基因作物，水稻作为主要粮食作物之一，近年来出现了大面积的粮食危机，而杂交水稻的增产又十分有限，但是，转基因水稻却能够大幅度提高产量。现在已有LLRICE62等多个品系的转基因水稻商品化[2]，而我国也已经育成具抗虫基因 (如Bt和CpTI基因)、抗病基因(Xa21)和抗除草剂基因(bar，EPSPS)等转基因水稻品系，它们的商品化生产正等待着国家的批准[3]。
随着转基因产业的迅速发展，转基因产品的安全性问题一直是国内外关注的焦点，它直接关系到人类的健康和生态环境安全，并且对国际贸易造成了一定影响，有关组织对此也表示极大的关注。为了加强转基因产品的管理，世界各国均已出台了相关管理办法。目前对转基因产品标识国大都有标识低限(阈值)，如欧盟的1％、韩国3％、日本5％[4-6]，而对未经批准的转基因产品则采取零阈值处理。
目前，转基因生物检测技术主要分为两大类，一类是基于蛋白质检测的检测技术，另一类是基于核酸检测的检测技术[7]。PCR是聚合酶链反应(Polymerase chain reaction)的简称,是利用核酸复制酶、引物和核酸单体组成，在试管内完成模板DNA复制的一种简便、快速、灵敏的定性检测法，是首选的检测方法。PCR技术几乎能检测所有种类的转基因产品，不受蛋白质表达的影响，且具有较高的灵敏度。