2 实验材料与方法
2.1 材料与试剂
超微过的黑蒜、乙醇、蒸馏水、正丁醇、氯仿、丙酮、三氟乙酸(TFA)、甲醇、三氯甲烷、盐酸羟胺、吡啶、乙酸酐、标准单糖(鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖)、肌醇
2.2 仪器与设备
RE-3000型旋转蒸发器(上海荣生生化仪器厂)、SHZ-Ⅲ 型循环水真空泵(上海荣生生化仪器厂)、 Centrifuge 5418型小型离心机(德国艾本德)、移液枪、水浴锅、电热恒温鼓风干燥箱、KQ-500B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、电子分析天平、Agilent 1260气相色谱-质谱联用仪、配备DB-17毛细管柱(60m×0.25mm×0.25um)
3 黑蒜多糖的提取
多糖的提取方法有水提法、酸碱提取法、有机溶剂提取法、超临界CO2法、酶法、超声波辅助提取法和微波辅助提取法[4]。在本实验中黑蒜多糖的提取采用水提法醇。运用此法提取黑蒜多糖,不但安全环保,而且选择性好、渗透性强、多糖浸出率相对较高。水提法提取多糖的主要原理是利用水对植物组织的穿透力强,通过热力作用可以使细胞发生质壁分离。
3.1 黑蒜多糖的粗提取
准确称取超微粉碎过的黑蒜样品40g加入蒸馏水400mL,在温度为80℃下水浴40分钟,水浴结束后抽滤2次。将抽滤后的溶液放入500ml的旋转蒸发瓶中,经旋转蒸发器浓缩到80mL,备用。