奖赏性食物(Palatable foods)是指高热量并具有享乐属性的食物。蔗糖是一种典型的奖赏性食物,具有高热量的能量属性以及奖赏属性。非热量增甜剂糖精钠甜度为蔗糖的300倍左右,但其不能被大鼠消化吸收,故只具有奖赏属性而不具有能量属性。研究表明[3],应激可提高奖赏性食物的摄入,即在应激条件下,个体对奖赏性食物更加偏爱。当给予遭受慢性应激的啮齿动物奖赏性食物,尽管总摄食量减少,它们仍将保持或增加糖或猪油的摄入。进一步的研究表明[4-5],奖赏性食物对某些应激反应具有缓解作用。因此,在应激反应过程中个体相对增加奖赏性食物的摄入可视为一种自我舒缓的重要方式。目前,对于奖赏性食物的能量属性和/或奖赏属性在缓解应激反应中所起的作用,仍不十分明确。一般认为至少部分奖赏性食物所引起的应激缓解效应是由于其奖赏属性。例如,采用蔗糖胃内管饲法(可在实现蔗糖能量属性的同时减少蔗糖所具有的觉和奖赏属性)处理束缚应激大鼠,蔗糖将不再具有缓解应激的作用[6]。但奖赏性食物的能量属性可能也起到了一定的作用。
本实验主要基于前人的研究成果,进一步对低氧暴露对大鼠应激行为以及活动量的影响;低氧暴露对大鼠食物选择性的影响;若低氧暴露后大鼠对奖赏性食物更加偏好,那么该偏好对应激行为有何种影响;若低氧暴露后大鼠产生对奖赏性食物的偏好具有缓解应激行为的作用,那么是奖赏性食物的能量属性还是奖赏属性在该过程中起作用等内容进行了探索。应激行为主要通过焦虑行为和活动量两个指标进行检测。焦虑行为通过高架十字迷宫实验(Elevated plus maze,EPM)检测,而活动量则通过旷场实验(Open field,OF)检测。本实验通过蔗糖溶液与糖精钠溶液分别研究奖赏性食物对低氧暴露后大鼠应激行为的影响及奖赏性食物奖赏属性所起的作用。本实验对找到一条缓解低氧应激反应的简便途径具有积极意义,并为低氧应激反应的形成与缓解机制研究奠定了基础。
2 实验材料与方法
2.1 实验动物
本实验采用购自浙江省医学科学院动物中心的清洁级雄性SD(Sprague-Dawlcy)大鼠。大鼠饲养条件控制为:使用聚丙烯塑料笼独笼独只饲养,每只大鼠每日给予40±0.1g的基础育成饲料(浙江省医学科学院动物中心提供)以及足量自来水,温度22±1℃,湿度60±10%,光照12L:12D。并对实验室定期打扫,保持清洁无异。对大鼠适应性饲养一周后再进行实验。
2.2 实验器材
动物饲养器材: 聚丙乙烯塑料饲养笼(25cm×l6cm×13cm);塑料水瓶(200ml)。
行为检测器材:自主活动旷场箱(100cm×100cm×15cm),无盖;高架十字迷宫动物行为学分析系统,由两条开臂(50cm×l0cm)和两条闭臂(50cm×l0cm×40cm)互相垂直呈“十”字交叉构成。在旷场箱中央上方以及高架开臂与闭臂中央接合区(10cm×l0cm)上方安装有摄像机以记录大鼠在装置中的行为。
低氧暴露器材:密闭减压舱(ZXZ-2,华东医药),主要结构为真空泵与舱体(90crn×150cm的圆柱体),通过调节进气阀门改变进气速度以调节舱内气压,以模拟高原低氧环境。
其它器材:电子天平、一次性酒精棉等。
2.3 实验方法
2.3.1 体重测定
选取体重159.9±7.1(g)左右的健康雄性SD大鼠42只,适应性饲养一周后(1-7天),随机分为两大组,标记为对照组(C)、5000m低氧组(H),每组21只大鼠;再将对照组(C)随机分为C、SC、HC三小组,低氧组(H)随机分为H、SH、HH三小组,每小组7只大鼠。本实验采用密闭减压舱对5000m海拔处低氧环境(含氧量10.8%)进行模拟,对照组采用实验室常压环境(杭州师范大学5号实验楼,含氧量20.9%)。每日上午9:00称量大鼠体重(g)。