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点滴后的试虫放入新鲜饲料中饲养,饲养条件:光周期为14L:10D,温度为(25±2)℃,相对湿度为60%~70%。以果蝇留足抽搐或毛笔轻触无反应为死亡依据,农药处理72小时后,记录果蝇死亡情况。
2 结果与分析
2.1转灰飞虱CYP6AY3v2果蝇品系对不同杀虫剂的敏感性测定
在获得稳定的转灰飞虱CYP6AY3v2基因果蝇品系的基础上,分别对启动灰飞虱CYP6AY3v2全身超量表达的转基因果蝇品系tub>CYP6AY3v2和对照组UAS-CYP6AY3v2果蝇品系,用乙虫腈、灭多威、氟虫腈3种杀虫剂进行生物测定,以了解CYP6AY3v2基因的过量表达是否可以提高试虫对不同杀虫剂的抗性[8]。
2.1.1转基因过量表达CYP6AY3v2的果蝇对乙虫腈的抗性
乙虫腈对转灰飞虱CYP6AY3v2基因果蝇品系的生物测定结果显示(图1),启动全身超量表达灰飞虱CYP6AY3v2的转基因果蝇品系tub>CYP6AY3v2与对照组UAS-CYP6AY3v2果蝇品系相比,在不同浓度的乙虫腈药剂处理下,实验组果蝇死亡率低于对照组果蝇的死亡率,并有显著差异。tub>CYP6AY3v2果蝇品系与UAS-CYP6AY3v2果蝇品系的抗性倍数为3.17(表2-1)。由此可以看出,转基因果蝇过量表达CYP6AY3v2能显著增强其乙虫腈抗性。
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