3.3 不同浓度的山梨酸钾对黄曲霉孢子后代孢子形态特征的影响 7
4 讨论 8
5 结论 10
参考文献 11
致 谢 13
山梨酸钾抑制黄曲霉生长的遗传学效应 引言
花生含有大量的蛋白质和脂肪,特别是不饱和脂肪酸的含量很高,且含人体所必需的8种氨基酸,是一种很好的蛋白质补充品,很适宜制作各种营养食品,并且营养价值很丰富,深受人类喜爱。花生在我国种植面积很大,占世界总种植面积的20 %,是重要的经济作物和油料作物,在保障我国植物油供给安全、增加农民收入和出口创汇中具有重要地位。但是花生在田间管理、收获、晾晒、储藏、运输和加工过程中常遭受黄曲霉菌的污染而产生黄曲霉毒素(AFT),对人类的健康造成了极大的危害[1-2]。黄曲霉毒素是强致癌物质,其致毒能力比砒霜强60倍,当人摄入的食物中黄曲霉毒素的量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入,可造成慢性中毒,生长障碍,引起纤文性病变,致使纤文组织增生。黄曲霉的致癌力也居首位,是目前已知最强致癌物之一[3-6]。因此,如何有效地防止黄曲霉毒素污染花生等农产品已成为一个亟待解决的重大课题。目前人们已经对黄曲霉的检测方法做了深入的研究,但还缺乏相应的经济、简便、有效的抑制其生长的措施。
山梨酸钾是一种分子结构特殊的不饱和有机酸盐,是良好的酸性防腐剂,在人体内可分解为二氧化碳和水,无残留,安全性好;并具有较高的抗菌能力,抑制霉菌的生长繁殖:其主要通过抑制微生物体内的脱氢酶系统,从而达到抑制微生物的生长繁殖和起防腐作用,对细菌、霉菌、酵母菌均有抑制作用。山梨酸钾因为价格低廉,又具有光谱的抑菌效果,而成为食品、药品、化妆品,特别是食品行业的首选防腐剂[7-10]。近年来,众多学者开展了对防腐剂抑制霉菌生长的研究,且取得了一定成果。山梨酸钾被认为是目前最为安全的防腐剂,因此,本实验以黄曲霉为实验材料,采用固体培养法,研究不同浓度的山梨酸钾对黄曲霉孢子萌发和生长的影响,旨在为寻找更为安全、经济、方便、适用的黄曲霉抑菌剂,为减少花生、大豆、玉米等食物霉烂变质造成的损失提供更多的理论依据。
1 实验材料
1.1 时间与地点
实验于2014年在周口师范学院生命科学与农学学院微生物学实验室内进行。
1.2 实验材料、试剂和用品
材料:马铃薯,购买于集市;黄曲霉菌种(Aspergillus flavus Ling),从发霉的花生果荚上提取纯化获得,并且该菌种具有一定的产毒能力。
试剂:山梨酸钾,蔗糖,琼脂粉
用品:量筒,烧杯,试管,玻璃棒,三角瓶,培养皿,酒精灯,报纸,纱布,涂布棒,脱脂棉等。
1.3 实验仪器
SW-CJ-2FD 型洁净工作台 苏净集团苏州安泰空气技术有限公司;
AL204 型电子天平 梅特勒-托利多仪器有限公司;
BX41 显微镜 广州市明美光电技术有限公司;
LDZX-50KB 型压力蒸汽灭菌器 上海申安医疗器械厂;
BCD-215KCM 型冰箱 青岛海尔股份有限公司;
电热恒温培养箱 上海恒科学仪器有限公司。
2 实验方法
2.1 培养基的配制
参考相关资料[11],分别配制查氏培养基、PDA固体培养基和含山梨酸钾的PDA固体培养基,高压灭菌后,备用。查氏培养基用于花生果荚上的曲霉的分离、纯化、鉴定及保存菌种,PDA固体培养基用于活化和黄曲霉孢子子代的培养,含山梨酸钾的PDA固体培养基用于培养黄曲霉孢子亲代。
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