目前,当前色谱法是效果最明显,应用广泛的分离手段,其进行分离的效率可达到对含有上百种以上组分的混合物,它可以在两个小时之内区分开[4]。薄层色谱应用领域广泛,因其概念简单,只需简单预处理便可将样品准确分离的特性,在农业、化工、药学、食品、环境科学等多方面领域广泛采用。除了可以定性鉴定外,还可以进行半定量或者定量分析鉴定。当然,每项技术都有自己的弊端和局限性,本次实验薄层色谱分析法足以完成论文,可以不用考虑在年内。人们历史的多年研究,习惯上通过分离后是否有颜色或是否有荧光、是否有紫外吸收来鉴别区分,对于没有这些因素特征的样品,一般情况下常常使用“显色法”,即在分离实验完成后,在色谱板上喷洒一些使所测化合显出颜色的显色剂,使其与样品之间发生相互作用来显色或者使成分发出光亮来确定位置状况。对于本论文采用氨基酸的肽键与茚三酮显色反应。
1.2.2核磁共振技术(NMR)在分子结构的测定中的应用
核磁共振技术(NMR)与其他常用的物理化学方法不同, 它可以在不破坏原本样品的前提条件下,利用构成分子的原子核自身的磁矩特性,准确迅速地给所测样品定量、定性、定结构,与此同时很多的数据参数NMR可以提供,这是其他方式不具备的。基于这个原理设计出的核磁共振波谱仪用来1.研究成分的化学位移,从而可以研究价电子对原子核的屏蔽作用,进而分析化学基团的存在; 2.能够研究样品的自旋一自旋偶合, 进而探究化学基团的空间构型、作用力以及相互作用关系; 3.能够测试物质反应的中和反应、动力学和质子交换反应等;4.通过对谱图的面积等参数的分析来了解被测样品在各种条件因素的影响下,其结构的与之相应变化情况[5]。
分子结构的测定必要工具之一便是核磁共振技术,一方面,NMR技术除了包括测定绝对构型外,还可以分析具有复杂结构的化合物。另一方面,因其谱峰的面积与质子数出现正比关系,所以核磁共振的定量分析也同样适用。与其他定量分析的方法相比,此法定量分析的最大特点就是1.不需要富于的任何绘制工作曲线2.不需要任何的校正因子。除此之外,氢、碳等元素,多组分混合物的分析都可以由NMR分析测定。应用核磁共振技术测定有机化合物的绝对构型,主要是测定手性辅基与底物反应得到的产物在1H或13C NMR上的化学位移数据,通过对照品与得到的△值来比较推算出手性底物中心的绝对构型[6]。样品的分子结构确定,可能需要很多的谱图,包括:1D的H谱、C谱、 DEPT谱;2D的碳一氢化学位移谱、氢一氢化学转移谱、远程化学位移谱以及J一分解谱等[6]。这些谱图能够详细地体现出H核之间或C核之间的电荷分布状况,阐明研究配合物中金属离子与配体的相互作用,进而阐明配合物的结构与性质的关系。现今,NMR技术最主要是用来处理复杂化合物结构解析。
1.2.3手性辅基
(1)手性辅基简介
手性中心是指一个四面体结构连有4个不同原子或基团或未成键的电子对即为手性中心,又称不对称中心。手性辅助基团是将一个含有手性中心的物质,通过不对称诱导形成化学键,与此同时连接到底物上,起到一个辅助过渡的作用,等到反应结束时自动移除。
手性辅助基团也有很多优点:
(a)容易得到手性辅基的一对对映体。
(b)应用范围广。
(c)产物纯度高。底物与产物可以通过结晶或柱层析分离。
(2)手性辅基的分类
A 杂原子硫
B SAMP和RAMP