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    摘要：肝素是一种带有很强负电荷的线性异质多糖，是一种临床血液抗凝剂。本课题组已经建立了一种基于量子点团聚成像检测肝素的方法，具有较好的检测限。考虑到手术后需要使用精氨酸中和过量肝素，本文考察了精氨酸对肝素诱导量子点聚合体的影响，发现精氨酸对量子点团聚比例几乎没有影响，因此量子点团聚成像检测肝素的方法可以用于术后中和肝素过程中肝素含量的检测。51437
    毕业论文关键词：精氨酸、肝素、量子点、量子点聚合体、抗凝血酶 III（AT III）
    Effect of arginine on the quantum dot aggregationinduced by heparinFan JinxiaoInstructor: Gai HongweiAbstract: Heparin is a kind of linear heterogeneous polysaccharid with strongnegative charge , and also a kind of clinical blood anticoagulation. Our group hasdeveloped a method based on quantum dots reunion imaging detection of heparin andhas better detection limit. Considering to need to use the arginine and excessivepostoperative heparin, this paper examines the arginine of heparin induced quantumdot the effect of the polymer, found that arginine almost have no effect on thequantum dots reunion ratio, thus quantum dots reunion imaging detection method canbe used for postoperative heparin neutralization heparin content detection in theprocess of heparin.
    Keywords: Arginine、Heparin、Quantum dot (QD)、Quantum dot aggregation、Antithrombin III (AT III)
    前言肝素作为抗凝剂应用于心脏手术等临床医学中，具有高效低价、易消除的优越性[1]，Olson 综述了其抗凝血分子机制[2]。手术中监测肝素的含量可以防止凝血，手术后监测肝素含量避免出血，因此定量监测血液中肝素水平是一个至关重要的问题。当前手术实践过程中主要是基于各种凝血时间来监测肝素的水平，例如测定激活凝血时间(ACT)[3]和局部血栓形成质激活时间(aPTT)[4]。肝素抗凝剂含量与血液凝固时间有关，但测量凝血时间并不是直接测量肝素的含量，而且用不同的方法从不同的仪器上测得的结果是不同的，甚至是可以相差甚远的。由于凝血反应是一个复杂的反应过程，涉及许多凝固因素，如凝血酶及其交互作用等，凝血时间就受到许多变量的影响，而凝血时间的检测所用的时间较长，检测结果也不准确。因此,仍有开发快速、有价值、操作方便的临床检测肝素的方法的需要。2013年 Bromfield 等人发表了关于肝素检测的综述[5]，
    这里我们只总结了自2013年以来发表的文献，主要是光学检测肝素的方法。我们将肝素感应器分类成turn-on、turn-off 和比率计三种类型。Turn-on类型的感应器,有两种常用的方法。第一种方法是通过添加肝素，使淬光剂或抑制剂脱离荧光探针，使猝灭的荧光或散射光恢复的肝素检测感应方法。比如 Ru 复合物淬灭 CdTe QDs[6]的荧光，加入肝素通过静电相互作用结合Ru，除去QDs 表面的 Ru，导致CdTe QDs 恢复荧光。石墨烯氧化物是红色荧光改良的聚乙烯亚胺(PEI)的淬灭剂，加入肝素后，肝素与石墨烯氧化物结合，释放带荧光的RB-PEI[7]。 鱼精蛋白诱发带荧光黄的金纳米粒子聚合导致荧光猝灭，添加肝素结合鱼精蛋白，打破了聚合使荧光恢复[8]。在肝素加到 RB-PEI溶液中除了可以使荧光恢复外， 瑞利散射(RRS)共振也会出现， 肝素竞争性结合 PEI 消除荧光桃红 B[9]，恢复了 RRS、荧光和荧光桃红 B 吸光度的信号强度。第二种方法是是利用聚合诱导发射(AIE)染料构造刺激传感器。例如，四苯乙烯是一个典型的AIE 染料，将它引入到带正电的环状有机铂分子上，一旦带负电荷的肝素加入，肝素由于静电相互作用聚集在环状铂分子上并导致荧光增强，可以用来量化从0 到28 μM 的肝素溶液[10]。就肝素的turn-off 式感应器而言，只要探针的设计精巧，就可以通过加肝素淬灭荧光，磷光和表面增强拉曼散射(SERS)等光学信号来进行检测。Polyadenosine-coralyne 复合体比 coralyne 本身发出的荧光强，随着肝素的加入，coralyne 从polyadenosine-coralyne 复合体上脱离， 荧光强度随肝素浓度的增加而降低[11]。 肝素钠由于电子转移也可以淬灭 L-半胱氨酸[12]改进的 CuInS2 QDs 聚合体的荧光和 Mn-doped ZnS QDs 聚合体的磷光[13]。 沈等人开发了一种连续进行的SERS试验进行肝素的测定。由于肝素诱导纳米颗粒的聚合和分离，肝素浓度的增加，Au@Ag 结构纳米粒子的SERS强度先增强，后又减弱[14]。为了减少单检测通道测量的误差，开发了比率计感应器。通常目标分子用比率计感应器检测时，波长检测的信号一个信号增加而另一个信号相应减弱，可以用比率计感应器的两个检测信号的光强度比来表示肝素浓度。例如，李合成的嵌二萘-缩氨酸荧光探针检测肝素[15]，源`自,751.文;论"文'网[www.751com.cn探针结合肝素时[16]，准分子发射强度增加和单体释放强度减弱[17]。 苯并芘[g,h,i]衍生物(BPDIs)是另一个最近形成的肝素比率计探针[18]，聚酯的(二烯丙基)氯化物(poly-DDA)诱导BPDIs 聚合，随着肝素的增加，肝素与 poly-DDA 结合导致BPDI 聚合体的释放，就能检测到一个准分子单体发射的信号，BPDI 单体发射信号减弱的同时准分子发射信号强度将增加[19]。除了双检测波长的同时改变用于检测肝素，单一响应的波长位移在肝素检测中也是有用的，常见的方法是通过加入肝素结合纳米粒子使带正电荷金纳米颗粒的颜色发生改变[20]。以上是一些肝素检测方法的开发及在最近几年的进展。然而，总结这些文献后，我们注意到，几乎所有的肝素感应器都是基于静电作用来识别肝素的，这无法确保肝素在血液中测定的灵敏度，以及排除其他阴离子分子对检测结果的干扰。此外，静电作用量化肝素的总量没有区分有效的和无效的部分，将导致高估肝素水平， 从而进一步导致手术后过量的中和剂(鱼精蛋白)及其可能引起的副作用[21]。
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