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    《中国药典2010》[33]第一部中描述了751椒,本品为茄科植物751椒Capsicum annuum L.或其栽培变种的干燥成熟果实。夏、秋二季果皮变红色时采收,除去枝梗,晒干。本品呈圆锥形、类圆锥形,略弯曲。表面橙红色、红色或深红色,光滑或较皱缩,显油性,基部微圆,常有绿棕色、具5裂齿的宿萼及果柄。果肉薄。质较脆,横切面可见中轴胎座,有菲薄的隔膜将果实分为2~3室,内含多数种子。气特意,辛、751。9858
    物理鉴别方法:通过观察形状和内部结构鉴别751椒。薄层色谱法鉴别:通过浸泡超声和离心处理获得供试样品溶液。用甲醇配制对照品溶液。经薄层色谱法试验,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
    HPLC法鉴别:使用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;用甲醇-水(50:50)为流动相;以检测波长为280nm,柱温40℃。要求理论板数按751椒素峰计算应不低于3000。分别检测了751椒素、二氢751椒素对照样品和751椒提取液,没有对合成751椒碱进行检测。
    2 751椒样品提取
    研究751椒素之前,对751椒素进行提取是很重要的,会直接影响之后的测量。在这方面有很多研究人员进行了大量的研究,提出来很多提取方法。吴丽威[1]在其硕士论文中系统的研究了提取751椒素和二氢751椒素的方法。李鑫[2],邓祥元[3],王艺臻[4],孙平[5],徐进[6]等人对提取工艺进行了深入研究及比较。吕循峰[7],李浩明[8]等人对751椒素的提纯做了大量的工作,得到了751椒素提纯的方法。李美粉[11]等人采取超声强化提取751椒素的方法,其效果比传统方法明显提升。张丽茜[12]等人使用超声-微波预处理的方法提取也有明显成效。吴丽威[10]等人利用无溶剂微波预处理-NaOH溶液搅拌法处理干751椒,提取时间短,提取率高。周华[15]等人利用混合溶剂萃取-碱溶结晶法提取751椒素,所得751椒素纯度可高达96%。Gerardo F. Barbero[30]等人研究了一种提取751椒素的方法Pressurized Liquid Extraction(PLE),并通过HPLC及荧光光谱,质谱检测。对每种751椒素的提取做了全面的分析。
    3 高效液相色谱法在测定751椒制品中751椒素应用
    游国叶[18]等人在测定751椒油中的751椒素含量的研究中,先通过甲醇丙酮(1:1)溶液在超声仪中提取多次样品,然后通过HPLC法,采用日本岛津LC一10AT高效液相色谱仪,CBM-102色谱工作站,日本岛津SPD-10AVP型紫外检测器,在Kromasil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5um);紫外检测波长280nm;流动性:甲醇-水(80:20);流速1.0ml/min的条件下测定751椒油中751椒素的含量。结果751椒素在50~300ug/ml的范围内,其线性回归方程Y=3554.2X+31083,r=0.9996,线性关系良好。加样回收率平均值为99.12%,重复性RSD为0.40。751椒油中751椒素含量是7.06%。
    张俐[27]等人对751椒浸出物中751椒素含量进行研究。选用waters 2996HPLC,以及Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 m)色谱柱,流动相乙腈:水(50:50),在检测波长229 nm下对751椒素含量进行检测。其结构重现性及精密度良好,,回收率为99.4%,RSD为1.22%。
    屠大伟[20]等人在测定火锅底料中751椒碱含量的研究中,也通过高效液相色谱法测定751椒碱含量。对样品的处理方面,采用甲醇:四氢呋喃(1:1)的提取液进行超声辅助提取。实验方面其采用Agilent 1100 高效液相色谱仪器,在Agilent ODS 色谱柱(250mm ×4.6mm,5μm);流速1.0ml/min的条件下,以乙腈水为流动性进行梯度洗脱。使用二极管阵列检测器(DAD),在280nm处进行检测。结果显示, 清油火锅底料中751椒碱含量为0.068mg/g , 牛油火锅底料中751椒碱含量为0.077mg/g , 方法加样平均回收率为101.85% 和102.69% 。
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