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第三章 树脂固定化漆酶的研究 14
3.1 实验部分 14
3.1.1主要试剂仪器 14
3.1.2 实验方法 14
3.1.3 实验内容 15
3.2 实验结果与讨论 16
3.2.1 最佳吸附树脂的选择 16
3.2.2 漆酶最佳吸附条件的选择 17
3.2.3 固定化漆酶的最佳反应条件 18
3.3 本章小结 20
第四章 固定化漆酶降解毒死蜱的研究 21
4.1 材料与方法 21
4.1.1 毒死蜱降解率计算 21
4.1.2 毒死蜱浓度检测 21
4.1.3 毒死蜱降解实验主要试剂及仪器 22
4.2 实验结果与讨论 22
4.2.1 毒死蜱降解实验及结果 22
4.2.2 关于毒死蜱分析方法的讨论 23
4.3 本章小结 25
第五章 结论与展望 26
致 谢 27
参 考 文 献 28第一章 前 言
1.1 毒死蜱
毒死蜱(chlorpyrifos)，又名：乐斯本（陶氏益农），白蚁清（陶氏益农），1965年由美国陶氏化学公司在美国登记。毒死蜱的有效成分为O,O-二乙基-O-(3,5,6-三氯-2-吡啶基)硫逐磷酸酯，其化学结构式为：
毒死蜱原药为白色颗粒状结晶，室温下稳定，有硫醇臭，比重1.398（43.5℃），熔点41.5～43.5℃，蒸气压为18.7×10-5毫米汞柱(25℃)，溶解度为1.2×10-4g/100g水，溶于大多数有机溶剂[1,2]。按我国农药毒性分级标准，毒死蜱属中等毒性杀虫剂。
1.1.1 毒死蜱的应用概况及存在问题
毒死蜱是目前全世界生产和销售量最大的杀虫剂品种之一，也是世界卫生组织唯一许可的有机磷品种。对害虫具有触杀、胃毒和熏蒸作用，可用于水稻、麦类、玉米、大豆、花生、棉花、果树、茶树、甘蔗、蔬菜和花卉等众多大田作物和经济作物上，防治水稻螟虫、稻种卷叶螟、小麦黏虫、叶蝉、棉铃虫、蚜虫和红蜘蛛等百余种害虫，对地下害虫、家畜寄生虫亦有较好的防治效果。到2007年底，我国毒死蜱产品共登记了596个品种，2003年全球销售额为45000t左右[3]。
毒死蜱虽然毒性较低，但随着人们对其安全性的认识，一些发达国家已经开始禁用毒死蜱。毒死蜱在欧盟国家的大量使用已使其在地中海沿岸的表面水中残留。由于毒死蜱具有生物富集作用，因此，其对周围的环境、生物以及人类会产生危害作用。有个案报告，4名美国儿童因其母在妊娠首3个月接触毒死蜱而于子宫中接触毒死蜱，结果出现广泛的出生缺陷，包括脑、眼、耳、胯、牙、心、足、乳头和生殖器等缺陷[4]。Whintey等[5]研究表明，毒死蜱在无明显毒性效应或代谢物产生的作用下可对大脑发育或功能产生影响，低剂量引起DNA和蛋白质合成特异性抑制，长期或重复给予亚毒性剂量可对细胞、神经轴突产生影响，甚至引起行为改变。2000年美国环境保护局官员C M Browner宣布禁止在美国家庭和庭院内使用毒死蜱杀虫剂，并减少毒死蜱在其他方面的使用[6]。产品如花生、萝卜、草莓、板栗等也有一定幅度的调整。由于我国两批输日新鲜豌豆被日方检出毒死蜱含量超标，日本厚生劳动省宣布自2004年10月13日起对我输日新鲜豌豆及其加工品实施入境批批检查毒死蜱项目。为了防止室内空气污染，日本还颁布了建筑物标准法，从 2003 年 7月开始控制使用甲醛、毒死蜱等有害化学物质。美国作出上述决定主要是由于毒死蜱可能对脑发育或功能产生影响，低剂量引起DNA 合成和蛋白质特异性抑制，长期或重复给予亚毒性剂量可对细胞、神经轴突产生影响；而日本于2003年2月有条件的恢复了对我国菠菜的进口，条件是在日本口岸对菠菜逐批检验毒死蜱，发现5％的检出率将再次采取禁止进口措施。2004年9月1日本启动进口食品农药残留新标准，此次对毒死蜱残留标准做了修改，有4种主要输日农产品的农残限量上调10倍以上（卷心菜、新鲜豌豆、哈密瓜、荞麦），其他由于使用范围及用量的不断扩大，毒死蜱在环境中的转归不容忽视。