菜单
　　

    (1)  YPD培养基（500ml）：酵母粉5g，蛋白胨10g，琼脂粉10g，蔗糖10g，ddH2O

    (2)  LB培养基(1L)：胰蛋白胨(Tryptone) 10g、酵母提取物(Yeast extract) 5g、氯化钠(NaCl) 10g、pH7.0左右，121℃灭菌20min。

    (3)  50*TAE: Tris242g; Na2EDTA-2H20 37.2g;冰醋酸 57.1 mL，加去离子水充分溶解定容至IL。

    (4)  TE buffer：1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml、0.5M EDTA PH=8.0 1ml定容到500ml 121℃灭菌20min。

    (5)  TSB：10%PEG3350、5%DMSO、10%甘油、10mM MgSO4、用LB pH6.1定容，121℃灭菌20min。

    (6)  5*KCM：0.5M KCL、0.15M CaCl2过滤除菌。

    (7)  BMGH培养基：2.0％甘油，8.5g/L硫酸铵，1.79g/L YNB(酵母基础氮源培养基)，4.0*10-4％生物素，用100.0mM  pH 7.0 磷酸缓冲液，121℃，20min灭菌。其中YNB和生物素需要过滤除菌。

    (8)  BMMH(Buffered Minimal Methanol)培养基：1.5％甲醇，8.5g/L硫酸铵，1.79g/L YNB，4.0*10-4％生物素，用100.0mM pH7.0磷酸缓冲液配置，缓冲液需121℃，20min灭菌，其余需过滤除菌。 源.自/751·论\文'网·www.751com.cn/

    2.2  方法

    2.2.1  表达载体pPICZαB-CBH2的构建

    2.2.1.1   pPICZαB质粒的获得

    用100mlLB液体培养基活化含有pPICZαB质粒的菌株，该菌株为上届师兄所保存的菌株，利用质粒小提试剂盒提取质粒，-20℃保存备用。

    2.2.1.2  目的基因CBH2的获得

    挑取购自于青兰生物公司含有目的基因CBH2的平板上的菌落接入到100ml的LB液体培养基中37℃ 150转隔夜培养。利用质粒小提试剂盒提取含有目的基因的质粒，-20℃保存备用。

  1. 上一篇：内切葡聚糖酶基因egl2在巴斯德毕赤酵母中的表达
  2. 下一篇：含几丁质有机肥对辣椒根围微生物区系的影响

  1. 外切葡聚糖酶基因（CBH2）...

  2. 内切葡聚糖酶基因在马克...

  3. 内切葡聚糖酶基因egl2在巴...

  4. 里氏木霉内切β-1，4-D-葡聚糖酶II基因的克隆

  5. 异色瓢虫越冬种群海藻糖...

  6. 假丝酵母细胞壁中葡聚糖的提取

  7. 木霉T-Aloe β-1,3-葡聚糖酶的功能分析

  8. 河岸冲刷和泥沙淤积的监测国内外研究现状

  9. 乳业同业并购式全产业链...

  10. 杂拟谷盗体内共生菌沃尔...

  11. 当代大学生慈善意识研究+文献综述

  12. 大众媒体对公共政策制定的影响

  13. java+mysql车辆管理系统的设计+源代码

  14. 酸性水汽提装置总汽提塔设计+CAD图纸

  15. 十二层带中心支撑钢结构...

  16. 电站锅炉暖风器设计任务书

  17. 中考体育项目与体育教学合理结合的研究

　　

About

751论文网手机版...

主页：http://www.751com.cn

关闭返回