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我们将该突变EGFR称为dnEGFR，它是将EGFR只切除胞内段部分而保留胞外段和跨膜段的突变基因，因此它表达的蛋白依然可以与其他正常ErbB蛋白结合形成同源二聚体或异源二聚体，但是胞内段的酪氨酸残基不能磷酸化，无法激活下游通路，从而达到抑制ErbB蛋白的磷酸化以及胞内信号强度的目的。将3.6kb的EGFR cDNA序列中表达胞内段蛋白的部分切去，留下跨膜段和胞外段的部分共2.3kb的片段即得到dnEGFR，将这个片段通过分子克隆形成重组质粒后分别与四个ErbB全长cDNA分子的重组质粒共转染使其在体外细胞中表达，在保证四个ErbB分子的表达量不变的前提下检测它们的磷酸化水平，通过以特异性酪氨酸磷酸化的抗体进行的蛋白印迹实验结果分析dnEGFR是否可以降低ErbB分子的磷酸化水平，再以同样的原理对其进行体内验证。已经有研究证明dnEGFR可以抑制EGFR信号[8]，同时又具有与其它ErbB受体结合的可能性，因此我们想将它开发为一个广谱的ErbB信号通路的细胞内分子抑制工具，并对其功能进行验证，由此帮助对由ErbB分子引发的精神疾病和癌症的分子机制的深入研究。
1.材料与方法文献综述
1.1实验材料
1.1.1实验小鼠
本实验中体外验证实验所用小鼠为基因组DNA中携带dnEGFR 的cDNA序列的B6;SJL-Tg(tetO-Egfr*)2-9Jek/J成年基因工程小鼠[8]；体内验证实验所用实验组小鼠为dnEGFR基因工程小鼠与Sox10-rtTA基因工程小鼠[9]杂交得到的子代双转基因鼠，该小鼠基因型为Sox10-rtTA;tetO-dnEGFR (缩写：sox10-dnEGFR)。
1.1.2载体质粒
本实验所用载体质粒为pcDNA™3.1/myc-His(-) A，质粒图谱如图1所示，该载体带有myc标记基因，可表达蛋白标签以标记重组质粒表达的蛋白
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