2.3 水质分析
2.3.1 总磷测定
本实验采用国家标准测总磷方法—钼酸铵分光光度法(GB 11893—1989)。
2.3.1.1 分析步骤
2.3.1.1.1 消解[11]
过硫酸钾消解:向试样中加4 ml过硫酸钾溶液,将具塞刻度管的盖塞紧后,用一小块布和线将玻璃塞扎紧,放在大烧杯中置于高压蒸气消毒器中加热,待压力达1.1 kg/cm ,相应温度为120℃时,保持30 min后停止加热。待压力表读数降至零后,取出放冷,然后用水稀释至标线。
2.3.1.1.2 发色
分别向各份消解液中加入1 mL抗坏血酸溶液(100 g/L)混匀,30 s后加2 mL钼酸盐溶液充分混匀。
2.3.1.1.3 分光光度测量
室温下放置15 min后,使用光程为30 mm比色皿,在700 nm波长下,以水作参比,测定吸光度,扣除空白试验的吸光度后,从工作曲线上查得磷的含量。显色时,室温低于l3℃ ,可在20℃一30℃水浴上显色15 min。
2.3.1.2 工作曲线的绘制
取7支具塞比色管分别加入0.0,0.5,1.0,3.0,5.0,10.0,15.0mL磷酸标准使用液,分别含有0.0,1.0,2.0,6.0,10.0,20.0,30.0μg磷,加水至25mL。然后按测定步骤进行处理。以水做参比,测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后,和对应的磷含量绘制曲线。
2.3.1.3 测定
量取25ml试样于50ml具塞比色皿中,按照2.3.1.1.1-2.3.1.1.3步骤进行测定。
2.3.1.4 空白试验
用25ml实验用水代替试样,按照2.3.1.1.1-2.3.1.1.3步骤进行测定。
2.3.1.5 结果的表示
总磷含量以C(mg/L)表示,按下式计算:C=m/V
式中:m—试样测得含磷量,μg;
V—测定用试样体积,mL。
2.3.2 总氮的测定
本实验采用国家标准测总氮方法—碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法(HJ636—2012)。
2.3.2.1 校准曲线的绘制
分别量取0.00,0.20,0.50,1.00,3.00和7.00ml硝酸钾标准使用液于25ml具塞比色管中,其对应的总氮含量分别是0.00,2.00,5.00,10.0,30.0,70.0μg。加水稀释至10.00ml,再加入5.00ml碱性过硫酸钾溶液,塞紧管塞,用纱布和线扎紧,以防滑出。将比色管置于高压蒸汽锅中,加热置顶压阀吹气,关阀,继续加热至120℃开始计时,保持温度在120-124℃之间30min[12]。自然冷却、开发放气,移去外盖,取出比色管冷却至室温,按住管塞将比色皿中的液体颠倒混匀2-3次。
每个比色管分别加入1.0ml盐酸溶液,用水稀释至25ml标线,盖塞混匀。使用10mm石英比色皿,在紫外分光光度计上,以水做参比,分别于波长220nm和275nm处测定吸光度。零浓度的校正吸光度。零浓度的校正吸光度Ab、其他标准系列的校正吸光度As及其差值Ar按公式计算。以总氮含量为横坐标,对应的Ar值为纵坐标,绘制标准曲线。
Ab=Ab220-Ab275
As=As220-As275
Ar=As-Ab
式中,
Ab——零浓度溶液的校正吸光度;
Ab220——零浓度溶液于波长220nm处的校正吸光度;
Ab275——零浓度溶液于波长275nm处的校正吸光度;
As——标准溶液的校正吸光度;
As220——标准溶液于波长220nm处的校正吸光度;
As275——标准溶液于波长275nm处的校正吸光度;
Ar——标准溶液校正吸光度与零浓度溶液校正吸光度的差。
2.3.2.2 测定
量取10ml试样于25ml具塞比色皿中,按照2.3.2.1步骤进行测定。
2.3.2.3 空白试验
用10ml实验用水代替试样,按照2.3.2.1步骤进行测定。