本实验将云南产地的高海拔乌天麻、红天麻与在校园种植的低海拔天麻比较得出它们的天麻素、天麻多糖含量,研究低海拔地区的人工种植天麻的价值。实验的数据可以为以后进一步研究低海拔人工种植的天麻提供理论依据。
2 材料方法
2.1 材料
低海拔天麻:2015年4月,采自淮阴师范学院校内杨树林,于2013年11月播种,蜜环菌菌种、米麻购自陕西留坝,菌材使用杨树椴木。取无病虫害、无霉变的新鲜天麻,经在干燥箱中55°C,烘烤48 h后,取出后用粉碎机粉碎,过60目筛,将得到的细粉装在试剂瓶中备用。
对照品乌天麻(产地为云南昭通小草坝2200米海拔处),红天麻(产地为云南丽江雪山2800~3000海拔处)。
2.2 仪器与试剂
天麻素标准品(批号20150310)购自上海金穗生物科技有限公司;无水乙醇,无水葡萄糖,蒽酮,80%硫酸,氯仿,正丁醇,上述试剂为AR级,购自国药集团化学试剂有限公司。
T6新世纪紫外可见分光光度计(上海精密仪器科学有限公司),电子天平(上海精密仪器科学有限公司),微波炉(LG LGWD700),旋转蒸发仪(上海亚荣有限公司),台式高速冷冻离心机(Eppendorf Centrifuge5810R),三用恒温水箱(HH-W420)源]自=751^`论\文"网·www.751com.cn/
2.3 样品前处理
将购买来的红天麻、乌天麻于干燥箱中55°C下烘烤48h,取出后研磨,过60目筛,将得到的细粉装在试剂瓶中,存于干燥器重备用。
2.4 天麻素溶液制备
分别精密称取天麻粉末0.5 g 3份于3个100mL锥形瓶中,各加入50 mL50%乙醇溶液,于电子天平上称量各锥形瓶及其中所盛天麻和溶剂的总重量,小火条件下微波加热20 s,取出待冷却至室温后,再微波加热20 s,反复5次,取出待冷却至室温后,再次称量,并用50%乙醇溶液定量至微波提取前的重量,用滤纸过滤各混合物,收集滤液至试剂瓶中备用[13]。用以上方法再制备红天麻溶液,种植的低海拔天麻溶液及新鲜天麻溶液各3份。