小麦叶绿素含量的多少决定了光能利用率的高低,小麦对田地中养分的变化十分敏感,实验证明为了获得高产、优质的小麦,生产上通过将小麦叶片叶绿素的含量变化引起的叶色变化作为营养管理、小麦氮素营养状况追踪和科学施肥判断的重要指标[6]。即在一定程度上,小麦叶片叶绿素含量可以反映整个小麦生长发育过程中的营养状况,所以研究小麦叶片的叶绿素的含量对于小麦的产量和品质显得十分重要。研究叶绿素含量以及对于实验中叶绿素怎样提取更快捷、方便、可靠也成为研究人员的重要课题。
叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素不溶于水但可溶于乙醇,丙酮等有机溶剂,因而可用有机溶剂对叶绿素进行提取。测量植物叶绿素含量的方法可分为分光光度计和活体叶绿素仪法两大类[7],其中被广泛运用的是分光光度计法,也被称作Arnon法,其原理是利用叶绿素溶解于有机溶剂的特性,将叶片在80%丙酮溶液中研磨提取,经过过滤或离心之后,在特定的波长下测定叶绿素液的光密度,再根据经验公式对叶绿素的含量进行计算。但是该方法在实际的操作试验中,不仅步骤多而且耗费工时,在光照条件下无法避免叶绿素分解带来测量的误差,特别强调的是对于大田试验中大量样品的测定十分困难[8]。Hiscox&Isrealstan用二甲基吕素亚砜(DMSO法)直接对叶绿素进行提取[7],相比于之前的Arnon法更加简便快速,但是提取的温度过高,非常温下对叶绿素有损,DMSO法的吸收光谱与Arnon法不同,用经验公式来计算会带来误差,且DMSO对人体有一定的毒害,所以不能延续使用[9]。但是此方法的思路却得到重视,陈福明和陈顺伟[10]等对不同配比的乙醇、丙酮、水以及三者之间的混合溶液对叶绿素的提取效果进行了详细研究分析,得出了混合液提取叶绿素的可行性。洪法水等[11]研究表明:乙醇与丙酮的混合液提取叶绿素存在增效作用,且乙醇与丙酮在等摩尔混合提取叶绿素效果最佳。笔者在前人的基础实验上筛选分析并得到快速简便测量叶绿素含量提取方法,从大田采取的小麦的叶片,实验室可用叶绿素分光光度计测量仪器出发,为准确测量冬小麦叶绿素的含量提供坚实可靠的科学依据[12]。