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摘 要: 脂肪酶又称甘油酯水解酶，是分解脂肪的酶，脂肪酶在各个应用领域都有很大的潜力价值。本文对脂肪酶生理生化性质作进一步的探索，为以后的研究提供技术资料。本实验首先从采集的富含油脂的土壤样品中培养筛选得到产脂肪酶菌株，对其生理生化性质鉴定和产酶条件的优化，实验结果表明，该菌株在以体积分数为1% 的橄榄油为诱导物，5g/L蔗糖为碳源，40g/L蛋白胨为有机氮源，1g/L (NH4)2SO4 为无机氮源，pH为6.5的培养基中，于28℃，180r/min摇床培养48h，可达最大酶产量（37.6±0.8）mmol/min/L。57412
毕业论文关键词: 脂肪酶，筛选，理化性质，产酶条件
Abstract: Lipase is also known as triglyceride hydrolases. It is an enzyme to break down fat, and has great potential value in various application areas. Physiological and biochemical properties of lipase was further explored to provide technical information for future research in this paper. Lipase producing strain was screened from soil rich in fats at the first time and the nature of the strain producing lipase was identified, at the same time, its fermentation conditions was optimized. According to the experiment, the maximum lipase production of (37.6±0.8) mmol/min/L was obtained at 28℃, 180 r/min and pH 6.5 after 48h incubation using olive oil (1%) and sucrose (5g/L) as combination of peptone and carbon sources, yeast extract (40g/L) and ammonium sulfate (1g/L) as nitrogen sources．
Key words: lipase，screened，physical and chemical properties，fermentation condition
目录
1 前言..3
1.1脂肪酶的简介3
1.2微生物脂肪酶的研究历程..3
1.3微生物脂肪酶的用途..4
1.4微生物脂肪酶的前景与展望.4
2 材料和方法4
2.1 实验材料与仪器.4
2.1.1菌种来源..4
2.1.2实验器材..4
2.2 实验方法.5
2.2.1培养基与储存液5
2.2.2实验步骤6
2.2.3筛选和酶活测定结果.8
3 菌种的生理生化性质鉴定.8
3.1鉴定方法8
3.2鉴定步骤8
3.2.1菌种形态的显微观察8
3.2.2菌种的生理生化性质鉴定结果9
4 菌种产脂肪酶条件的优化和酶学性质的探索10
4.1培养温度对产酶的影响..10
4.2初始pH值对产酶的影响.10
4.3不同碳源对产酶的影响..11
4.4不同氮源对产酶的影响..12
4.5不同金属离子对产酶的影响.12
4.6培养时间对产酶的影响13
结论..15
参考文献.16
致谢..18
1 前言
1.1 脂肪酶的简介
脂肪酶（Lipase，EC3．1．1．3，甘油酯水解酶）是分解脂肪的酶。它在动植物体和微生物中广泛存在[1, 2]，它能催化天然底物油脂（甘油三酯）的水解，在轻工、化工、医药、食品等行业有广泛的应用。脂肪酶还具有另一重要特征是对于异相的系统具有作用，即在油（或脂）一水界面上的作用，其对均匀分散的或者是水溶性底物无作用，即使有作用也是极其缓慢的，因而脂肪酶也可说是专门在异相系统或水不溶性系统的油（脂）一水界面上水解酯的酶。在脂肪酶的各种来源中，细菌脂肪酶在有机相中催化的反应类型多、反应活性及稳定性最高[3]。
1.2 微生物脂肪酶的研究历程
脂肪酶是最早被研究的酶类之一。最初从1834年兔胰脂肪酶活性的报道至今的微生物脂肪酶研究历程已有上百年的历史。微生物发酵法的应用前景事实上要远大于提取法及化学合成法的应用前景。如今，各种产脂肪酶的菌种如：白地霉、黑曲霉[4]、毛霉等微生物来源的酶已经能制造出结晶。丝胞酵母[5]、根霉[6]、圆柱假多球等，并且对于脂肪酶的理化性质[7]进行进一步的研究开展。在60年代，曲霉、假丝酵母[8]等菌种产脂肪酶都陆续在日本逐渐开始商品生产模式（见表1）。相比较而言，我国于60年代左右已经开始脂肪酶的开发研究。在1967年，中科院的微生物所进行筛选得到假丝酵母AS2.1203并且在1969年供应市场的酶制剂相应产生。