1,2,4,6-Tetragalloyl glucose致结肠癌细胞凋亡分子机理的研究

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摘要：目的探讨1,2,4,6-Tetragalloyl glucose (1,2,4,6-四没食子酰葡萄糖) 致人类结肠癌细胞的凋亡的分子机理，及其致细胞凋亡的所采用的凋亡途径。方法用四甲基偶氮唑蓝(MTT) 比色法评价细胞生长情况，DAPI染色后用激光扫描共焦显微镜观察细胞。Annexin V-FITC染色测定凋亡率并用流式细胞仪进行分析。用Western印迹分析检测BAX和Bcl-2 MAPKs的表达，并用迷你BIS图像分析系统观测。用SPSS软件对得到的数据进行分析。结果抑制细胞增殖和通过触发线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。55750

毕业论文关键词：1,2,4,6-Tetragalloyl glucose 凋亡线粒体途径

Abstract: Purpose We explore the mechanisms of 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose induced apoptosis in colon cancer cells. Method: The cell viability was evaluated by 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide (MTT) assay; ROS level in cells were determined by DHCA-DA by flow cytometry. Moreover, the MAPKs (JNK, p38, and ERK) were evaluated by western blot. All analyses were performed using SPSS. Result: 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose inhibited human colon cell growth in ROS-dependent way.

Keyword: 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose apoptosis Mitochondrial pathway

1、前言 4

1.1 结肠癌的简单介绍 4

1.2 结肠癌的治疗方法 5

1.3 核桃的来源 6

1.4 核桃青皮 6

1.5 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose的分子式 7

2、材料方法 7

2.1 药品与仪器 7

2.1.1化学药品 7

2.1.2仪器 8

2.2 细胞株和细胞培养 8

2.3 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose 对于HT-29细胞抗增殖作用 8

2.4 光学显微镜检查 8

2.5 DAPI染色 8

2.6 Annexin V-FITC染色测定凋亡率 9

2.7 活性氧(ROS) 水平的测定 9

2.8 半定量逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR) 9

2.9 Western印迹分析 10

2.10 统计分析 10

3 结果 10

3.1 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose 抑制 HT-29 细胞增殖 10

3.2 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose 通过触发线粒体凋亡途径诱导细胞死亡 11

3.3 1,2,4,6-Tetragalloyl glucose 对 MAPK 磷酸化和 Akt 信号转导的影响 11

4 讨论 12

结论 14

参考文献： 15

致谢 17

1、前言

1.1 结肠癌的简单介绍

恶性肿瘤就是人们所说的癌症，它是100多种相关疾病的统称。当身体内细胞发生突变后，它会不断地分裂，不受身体控制，最后形成癌症。是当今世界上威胁人类身心健康的重要疾病之一，是仅次于心血管疾病的人类第二大“杀手”，根据世界卫生组织报告，每年全世界死于癌症的患者约700万左右，预计未来10年癌症的发病率与死亡率仍将继续攀升[1]，而且癌症的治疗费用比较高昂，给患者及其家庭带来了痛苦和沉重的经济负担,对于家庭和社会都有着极大的危害。