淀粉酶还可以分为α-淀粉酶与β-淀粉酶。α-淀粉酶多存在于动植物以及微生物中[9]。我国α-淀粉酶剂型品种和生产菌株都很单一[10]。淀粉酶中大多数都以Ca2+为必需因子并且能作为稳定因子与激活因子,还有一部分淀粉酶是非Ca2+依赖型。淀粉酶对直链淀粉和支链淀粉作用,没有差别地任意切断糖链内部的α-1,4-链。因此淀粉酶的作用为引起底物溶液浓度的快速降低和碘反应的消失,它在分解直链淀粉时,最终产物以葡萄糖为主,另外,还有少数麦芽三糖以及麦芽糖。α-淀粉酶广泛应用于燃料酒精、淀粉糖浆、传统酿造、食品加工、纺织退浆等行业[11]。另外一方面在分解支链淀粉时,除了葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖外,源'自:751`!论~文'网www.751com.cn还产生分支部分,有α-1,6-键的α-极限糊精。分解限度拿葡萄糖为标准一般为35-50%,但是于细菌的淀粉酶中,也有高达70%分解限度。
β-淀粉酶与α-淀粉酶的不同点在于,β-淀粉酶是从淀粉非还原性末端,以麦芽糖为单位依次切断α-1,4-葡聚糖链。β-淀粉酶作用于支链淀粉或葡聚糖的时,切断至α-1,6-键的前面时反应就停止了,因此会生成分子量比较大的极限糊精。从以上所述的α-淀粉酶和β-淀粉酶的作用点与作用方式,分别提出了α-1,4-葡萄糖水解酶和α-1,4-葡聚糖-麦芽糖水解酶等名称。
微生物的许多种类都能产生淀粉酶,Buchanan和Tamuri等人表达了数百种嗜热真菌和上千种细菌,可以产生淀粉酶,仅仅芽孢杆菌属48个种里就有32个种能够产生α-淀粉酶[12]。淀粉酶种类繁多,特点各异,淀粉酶对淀粉的分解作用是生物体用淀粉进行新陈代谢的初级反应,就是工业上利用淀粉为依据[13,14]。它应用于果汁、印染、造纸、酿造与医药、工业副产品、食品加工、洗涤剂以及废料的处理,微生态制剂等多种领域[15]。如今所得淀粉酶活力最高可到达260U/mL左右。虽然有很多微生物都能产生淀粉酶,但是适合商业生产锁需的菌株很少,在淀粉酶生产的过程中,选择合适的菌株为最重要的前提条件。本文主要研究了土壤中产α-淀粉酶生产菌的筛选及并对这种高产菌株进行了初步的鉴定并且分析,为菌株的实际生产应用奠定了初步的研究基础。
2 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 土壤
在学校食堂附近土壤以五点采样法来采集土壤样品,每一个土样25g左右(每个点为5g)。把土样放入无菌的纸袋中,并且记录采集的时间和地点,放置于4℃冰箱中保存备用。分别记做A土样、B土样。