3.1 PCR定量数据 5
3.2 目的基因和内参的扩增 6
3.3 PCR数据处理 8
3.4 ACTC1基因表达差异性结果 8
4讨论 9
5结论 10
参考文献 10
致谢 12
图清单
图序号 图名称 页码
图3-1 ß-actin基因溶解图 6
图3-2 ACTC1基因溶解图 7
图3-3 ß-actin基因扩增图 7
图3-4 ACTC1基因扩增图 8
图3-5 ACTC1基因在各组织表达水平图 8
表清单
表序号 表名称 页码
表2-1 仪器设备 2
表2-2 荧光定量反应体系 4
表3-1 ACTC1基因在山羊八个组织的表达量 5
1 引言
中国山羊饲养的历史可以追溯到夏商周时期。早在很久以前,中国农民就已经开始饲养山羊,后来养羊产业逐步发展兴盛。中国的山羊产业具有分布广,范围大的特点。由于南方地区自然条件受限,一些不能养绵羊的地区却可以养山羊。
徐淮山羊是产自于徐州、淮阴等地区的兼用型地方山羊品种。徐淮山羊具有被毛白色、角粗壮且是三角形、颜色为琥珀色、额微微突起、嘴十分狭长、耳朵微微微翘起、体型类似方形、腹部紧缩,四肢微高,蹄是白玉色,尾巴短且上翘的特点。该品种产羊地多为沙碱土,土质贫瘠,羊粪为优质有机肥,利于改良土壤,提高农作物产量。经过长期选择和选育,产生了具有成熟较早、产羔较多、耐受粗放、优良的板皮质地等特点的徐淮山羊。
ACTC1基因全称是心脏ɑ肌动蛋白(Alpha-cardiac actin),早前已经有研究[1,2,3]发现ACTC1基因是一种心脏特异表达的结构基因。在胎鼠心脏中,ACTC1基因表达于心肌细胞细胞质中,心脏组织中存在ACTC1基因表达下调。ACTC1基因表达下调可诱导心肌细胞凋亡,可能与先天性心脏病的发生有关。多数研究表示此基因的异常与心肌病(肥厚型心肌病[4,5,6]及扩张型心肌病[7])的发生紧密相关。2008年Matsson等人在对房间隔缺损家系的研究中发现,ACTC1基因可以造成家族性房间隔缺损[8,9,10]。经过搜索,没有发现研究ACTC1基因在山羊组织的表达差异性的相关文章,本次实验使用实时荧光定量PCR方法检测ACTC1基因在八个组织表达的差异性。为未来研究ACTC1基因与各组织器官的生长发育、功能维持等提供前期实验依据。
2 步骤、材料和方法
2.1步骤
提取RNA→检测RNA浓度→逆转录→ 实时荧光定量→统计分析数据→总结讨论→撰写论文
2.2 材料
2.2.1样本
实验的样本是徐淮山羊胎羊的八大组织(心、背肌、腿肌、肝、脾、肾、肺、肠),每个组织收集3份并且洗净,快速的放在液氮中,带回实验室保存在-80℃冰箱中。