尽管国内临床上已有用于治疗眼镜蛇咬伤的抗眼镜蛇毒血清,但由于蛇毒组成的类群间差异,在实际救治时,抗血清治疗效果必然会存在类群间差异。与其它类群蛇毒相比,特定类群蛇毒中,一些组分的含量可能要明显偏高而另一些组分有可能相对偏低,如果以中和高含量组分为标准注射抗血清,就容易增加血清反应的危险,如果仅以中和低含量组分为标准注射抗血清,就会因无法彻底中和蛇毒而耽误患者救治。因此,在这种情况下,如果能采取类群特性抗蛇毒血清注射患者,就能避免上述缺陷,保障患者得到安全、有效的治疗。
通过实验室条件下对比,我们已经知道同一种毒蛇不同种群下蛇毒是存在差异的,如果能明确同种类不同种群毒蛇的具体蛇毒差异,不仅在生态学上和进化上具有极大的意义,也可进一步采取类群特性抗蛇毒血清对患者进行治疗,能更好地确定抗蛇毒血清使用剂量等条件,避开已知弊端,为蛇伤急救提供更有效的治疗手段。
2 材料和方法
2.1 蛇毒和商用抗蛇毒血清
在2013年10-11月间,分别采集实验用七个地理种群(海南五指山、广西百色、广西全州、广东翁源、浙江丽水、浙江舟山和江西赣州)的舟山眼镜成体,带回杭州师范大学两栖爬行动物研究中心,饲养于人工气候室内,定期投饲小白鼠和泥鳅。蛇毒采集前,动物禁食1-2周,期间保证足量饮水。随后用咬膜皿法提取蛇毒,鲜毒经10000 g,4 C离心10 min去除杂质后,真空冷冻干燥,存放于-80 C备用。商用抗眼镜蛇毒血清购自上海赛伦生物技术有限公司。
2.2 蛋白浓度测定
以马免疫球蛋白和牛血清白蛋白作为标准蛋白,用Bradford法分别测定抗体和蛇毒的蛋白浓度,所有检测均重复三次。