建兰花叶病毒(CymMV)沉默载体的沉默效应检测

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摘要兰科植物以其花姿绰约，花朵逞娇呈美，花香馥郁扑鼻而深受人们喜欢，具有重要的观赏价值、药用价值及经济价值。但是种植和培育兰花却没那么容易，极易受病毒的侵害，且程度严重，甚至无法根治。因此如何提高兰科植物的病毒抗性对于提高其价值有十分重大的意义，目前采用RNA沉默的方法来抵抗病毒抗性。此次实验将选用较为方便的本氏烟RNA沉默作为实验主题。并通过将本氏烟作为建兰花叶病毒的理想模式寄主。此次实验的目标，是为实现将建兰花病毒的抗性提高到一个新的层面。因此选取建兰花叶病毒所含有的CP蛋白，来构建所需的dsRNA分子。44283

Abstract Orchid is famous for its beauty and floral fragrance assail the nostrils,so Orchid is loved by people. It has important ornamental value, medicinal value and economic value. But it is not easy to plant and cultivate of orchids , it is vulnerable to viruses, with serious degree, even unable to effect a radical cure. So how to improve the Orchidaceae plant virus resistance is very important for improving its value, at present,people always use RNA silencing to resistance to virus resistance. This study takes Cymbidium mosaic virus as the object, Nicotiana benthamiana as a model host, Cymbidium mosaic virus CP protein to construct dsRNA molecule causing the Nicotiana benthamiana RNA silence, thereby improving the orchid virus resistance.

毕业论文关键词：建兰花叶病毒；沉默载体;转基因；本氏烟

Keywords: Cymbidium mosaic virus; t; transgenic; Nicotiana benthamiana

一、引言 1

二、正文 2

1. 实验材料 2

1.1 建兰花叶病毒 2

1.2 模式寄主 2

1.3 RNA沉默载体 3

2. 实验过程 4

2.1 转基因本氏烟的培养 4

2.2 重组载体的摇菌 4

2.3 CymMV沉默载体处理本氏烟植株 5

2.4 CymMV沉默载体与病汁液共处理本氏烟植株 5

2.5 RT-PCR检测CymMV沉默载体处理的本氏烟植株 5

三、实验结果 5

1. CymMV沉默载体处理本氏烟后植株正常生长 5

2. RT-PCR检测CymMV沉默载体处理的本氏烟 6

3. CymMV沉默载体与病汁液共处理本氏烟后植株生长状况 6

4. 检测本氏烟体内病毒CP基因的表达量 7

5. 结果分析 8

四、讨论 8

参考文献 10

致谢 11

一、引言

兰科植物的观赏价值、药用价值及经济价值是不容小觑的，但是她的娇贵也是出了名，培养和种植兰花并非易事，其中影响兰花经济价值的最大因素是病毒。科学家们花费了大量的时间去研究植物病毒，以提高其经济价值。但是目前我国生物科学对于植物-病毒互作机制的研究远远不够，换句话说这是一个十分有前途的研究方向，无论是对于生产生活还是今后生物科学的发展都起着至关重要的作用，对于植物-病毒互作机制的研究在很大程度上是可以推动生物科学的发展，当然对于植物-病毒互作机制的研究同时也要依赖生物科学技术的发展，因为两者是相辅相成密不可分的关系。在人口流动日益频繁的当今社会，一旦爆发病毒性瘟疫往往是不可控制的，通过植物-病毒互作机制的研究对于今后人体-病毒互作机制的研究也是有极大的帮助，使人类可以更好地控制甚至利用病毒。