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摘要：以转基因番茄（MCM2 RNAi基因）的种子作为原始材料，把种子进行消毒灭菌后在含有潮霉素的1/2MS培养基上进行播种，之后静待萌芽，获得转基因番茄的无菌苗。将无菌苗移植到土壤中，最后得到转MCM2 RNAi基因番茄后代的植株。每组的叶片尽量选用形状相近的，先对其进行基因组DNA检测，将三个转基因株系标记为10#、11#、13#三组并增加对照组野生型标记为CK。分别检测四组在离体0min、30min、90min、210min、330min、450min后的失水量，对其进行抗旱性分析。同时取另外的叶片，进行叶绿素含量的检测。实验结果表明，三个转MCM2基因后代株系的叶绿素含量以及抗旱性均高于野生型番茄。42726
毕业论文关键词： 转基因番茄；MCM2；RNA干扰；抗旱性；叶绿素含量
Drought resistance and chlorophyll content analysis Transgenic tomato
Abstract: Transgenic tomato （MCM2 RNAi） seeds were taken as plant material. The seeds were geminated on the medium with half MS salts(1/2 MS) and hygromycin after sterilization. The transgenic tomato plantlets were transplanted into soil after genomic DNA PCR amplification for confirmation of transgene. Water loss of transgenic plants (line 10, 11 and 13) and control was determined by comparing fresh weight of detach leaves in different time (0min, 30min, 90min, 210min, 330min, 450min). Leaf chlorophyll content was also compared between transgenic plants and control. The results here showed that chlorophyll content of transgenic tomato plants inhibiting MCM2 gene expression via RNA interference (RNAi) methods were higher than that of wild-type tomato and and the transgenic plants resistance to drought stress.
Key Words： Transgenic tomato；MCM2；RNAi；Detection；Drought Resistance；Chlorophyll content
目 录
第一章 绪论 4
1.1.番茄 4
1.2.转基因番茄的研究 5
1.2.1 MCM基因的研究 6
1.2.2 RNA干扰技术的研究 8
1.3.抗旱性的研究 10
1.4.叶绿素的研究 11
1.5.研究目的与意义 11
第二章 材料与方法 13
2.1.实验材料 13
2.2.试验方法 13
2.2.1转基因番茄PCR鉴定 13
2.2.2纯化DNA 13
2.2.3转基因番茄叶片抗旱特性研究 14
2.2.4转基因番茄叶绿素含量检测 14
第三章 结果与分析 16
3.1.转基因番茄后代PCR验证 16
3.2.转基因番茄叶片抗旱特性研究 16
3.3.转基因番茄叶绿素含量检测 18
3.4.总结 19
致谢 21
参考文献 22
第一章 绪论
1.1 番茄
番茄，（学名Lycopersicon esculentum Mill.，英文名Tomato），茄科茄属番茄亚属的典型双子叶园艺植物。也被称作西红柿或者洋柿子。果实为扁球状或近球状，颜色为桔黄色或赤红色，表面光滑，果实肉质而有大量汁液。番茄中富含维生素A、C及D，它的酸性是由于在番茄内部富含柠檬酸和苹果酸所导致的。番茄在营养价值上非常有研究性，它富含多种维生素，相比苹果、猕猴桃、香蕉、火龙果等都高出2—4倍。主要含维生素B1、维生素B2、胡萝L素、苹果酸、柠檬酸、磷和烟酸、番茄碱、胆碱、糖类、蛋白质、钙、铁和谷胱甘肽等等。此外研究表明番茄红素具有很强的抗氧化活性，可以抗血管硬化、抗老化、保护皮肤以及预防白内障，并具有很强的消除氧气中自由基能力，可以诱导细胞之间的连接通信，并且可以用来调节控制肿瘤细胞的增长，血液中的番茄红素浓度可以控制甚至有效抑制前列腺癌、食道癌、皮肤癌、胰腺癌、胃肠癌、乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌等疾病的发病率，尤其对于前列腺癌的防治作用最为显著，而番茄是番茄红素最丰富的食物来源。[1]目前研究者在出产药用蛋白、抗体、口服疫苗、病毒转基因番茄疫苗等中已经广泛利用到了番茄中的这种可提取的物质。