2 材料与方法
2.1实验动物
本研究实验动物来自秦川牛的血样共124个(见表2-1),分别进行了全血基因组提取,共得到质量很好的DNA样78个,所采血样的秦川牛均为健康的成年母牛。
表2-1 实验动物情况
Table 2-1 Experimental animals’situation
品种
Breed 数量
Quantity 样品
Sample 来源
Source
秦川牛 124 血样 陕西秦川牛良种繁育中心和陕西省秦川牛原种场
2.2 实验主要试剂
本研究所使用的主要试剂见表2-2。
表2-2 实验主要试剂
Table 2-2 The main experimental reagents
生化试剂与分子生物学试剂 普通试剂
酶类 Taq DNA聚合酶 蛋白酶K 柠檬酸、十二烷基硫酸钠(SDS)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙二胺四乙酸(EDTA)、无水乙醇、NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4、Tris饱和酚、柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、氯仿、琼脂糖、溴酚蓝、溴化乙锭(EB)、硼酸、葡萄糖、醋酸钠、乙酸、蔗糖、TEMED、丙烯酰胺、异戊醇、甲酰胺、甘油、过硫酸铵、NaOH、甲醛等
dNTPs 北京鼎生生物工程有限公司
Markers(DL2000 Marker) 北京鼎生生物工程有限公司
2.3 血样基因组DNA提取液
本研究所使用的血样基因组DNA提取所用的溶液和组成参考孙加节2010年硕士论文。
2.4 电泳检测DNA所用的缓冲液[10]
(1)10×TBE缓冲液:称取硼酸55.62 g,Tris 108.99 g,EDTA 29.23 g,用ddH2O定容到1 L,用标准酸度计调节pH至8.0 后高压灭菌分装。
(2)0.5×TBE缓冲液:将50mL10×TBE溶液稀释到1L后备用。