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    2.3苏淮猪基因型与表型的关联性分析4
    3.讨论4
    3.1IGF2基因突变对遗传表型影响的研究 4
    3.2IGF2第3内含子3072位点对肌内脂肪含量(IMF)的影响 5
    4.结论  5
    致谢6
    参考文献6
    IGF2基因多态性对苏淮猪肌内脂肪含量的影响
    猪肌内脂肪肪含量与猪肉的嫩度和多汁性密切相关,决定了猪肉的风。动物肌内脂肪的发育形成主要来自于出生前肌内脂肪细胞的多少、出生后短期内肌内脂肪的分化增殖和出生后脂肪细胞的肥大[1]。目前对研究影响肌内脂肪含量的基因主要集中在和脂肪代谢相关的基因,但是对影响肌内脂肪含量的主效基因尚未统一的定论,对候选基因及其机制尚不是很透彻[2]。
    胰岛素生长因子2(IGF2)由9个内含子和10个外显子组成,是一种父系表达基因可能是胎儿的一种生长激素[3],在猪生长发育、肌肉生长和脂肪沉积有显著的调控作用[4],当该基因表达失活时,胎儿初生重仅为正常的野生型胎儿的60%[5]。大量的研究表明IGF2 是影响猪脂肪沉积性状的候选基因,IGF2对背膘、眼肌面积有显著的影响。刘桂兰[4]在对大白猪×梅山猪的杂交后代的研究显示IGF2基因在内含子8上有两个Nci iv酶切位点(位点A和位点B),两位点皆具有多态性,位点A的A1A2型基因个体比A2A2型个体在肩部背膘、第6-7肋背膘、臀部背膘的膘厚,均有显著差异(P<0.01)。酶切位点B纯合子基因型B2B2比突变型B1B1个体的平均背膘薄18.28%,差异显著,瘦肉率高6.35%,差异也显著。刘鑫等在对宁乡猪、杜洛克、长白猪的研究也证实了这两个位点的多态性对背膘和瘦肉率的影响差异性显著[6]。Laere[7]研究显示内含子3的3072位点存在着单一的碱基突变,存在着等位基因A和G,影响着猪IGF2基因的表达,虞德兵等[8]研究发现A 型个体臀部膘厚比G型个体薄15.31% (P<0.01);胸腰部膘厚比G型个体薄23.74% (P<0.01);第6-7肋膘厚比G型薄20.27% (P<0.05); A 型个体与G型个体眼肌面积、活体瘦肉率、嫩度间的表型差异也十分显著(P<0.01)。IGF2基因的多态性对背膘、猪肉嫩度的影响的差异性,说明了IGF2是影响猪脂肪沉积的一个重要基因。
    有研究表明IGF2基因表达量在同一品种不同日龄表达具有差异性[9],长白猪IGF2基因在30日龄时的表达量达到最高,之后逐渐下降,至120日龄降到最低,150日龄时又明显上升;太湖猪IGF2基因表达量从出生开始一直递增,在30日龄的表达量较高,90日龄降至最低,120日龄略有上升;五指山猪IGF2基因表达量从出生开始增加,30日龄时表达量最高,以后随着日龄增加而递减,在150龄时达到最低,差异极显著(P<0.01)。IGF2基因的表达也存在种间差异,120日龄时太湖猪 IGF2基因的表达量高于长白猪,差异极其显著(P<0.01);沂蒙黑猪在90日龄的IGF2基因的表达量高于长白猪差异极其显著(P<0.01)[10]。总体来说中国本土猪在同一日龄IGF2基因表达量高于大白猪和长白猪。所以对苏淮猪IGF2基因的研究显得很有必要。
    本试验将对苏淮猪IGF2基因内含子3的3072A>G变异位点的不同基因型和肌内脂肪含量的关联性进行分析,从分子水平上来鉴别影响猪肌内脂肪含量的关键基因。
    1 材料与方法
    1.1猪耳样和肌肉样品的来源和保存:选取7-8月龄,胴体重在60-80KG的适宜屠宰的苏淮猪采集耳尖样品放置在酒精管内,浸入70%的酒精溶液密封,放置在4℃冰箱保存。取胸腰结合处的背最长肌的肌肉样品,用真空机抽出空气保存,放置在-20℃冰箱储存。
    1.2主要仪器:真空机、索氏抽提设备、分析天平、水浴锅、干燥器、烘箱、1.5离心管、2 ml离心管 、高速冷冻离心机、匀浆机 、钢珠磨样机
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