近年来,使用荧光标记的方法来研究生物学、源-自/751+文,论^文'网]www.751com.cn医学,这种方法对于研究的进展起到了非常重要的作用,尤其是6-羧 基荧 光 素现在已经是用 来检 测蛋 白 质,DNA序 列的国 际 通 用的荧 光 染 料。所以找出一条用于工业化生产的合成6-羧基荧光素琥珀酰亚胺脂的合成方法是很重要的。现在有相关文献报道说荧光素的合成方法是用原料混合搅拌均匀后用氧化锌催化合成得到荧光素,这种合成路线虽然很简单,但是产物很难提纯出来,杂质不容易分离,所以,如果用 甲 基 磺 酸做 溶 剂,杂 质 很 容 易 除 去。因为于这种合成方法合成得到的是5和6-羧基荧光素异构体的混合物,他们的物理化学性质比较相近,不易分离,常用的合成方法是用过柱子的方法进行分离,但是这样只能进行小批量的生产,而且生产的成本很大,不适合工业化的生产。有文 献 报道 合成 琥 珀 酰 亚 胺 脂的方法是在二 甲 基甲 酰 胺溶 剂中和 琥 珀 酰 亚 胺 脂 反应,本 文尝 试用 这 种方 法,经探 索后 发 现 特 戊 酰 基在二 甲 基 甲酰 胺中容 易 水 解,因此用乙腈作溶剂后,收率较好,实验效果不错。
1.1 荧光概述
1.1.1 荧光的产生和发展
荧光的概念:当某种物质被紫外光或者可见光照射时,我们会发现很多不一样的光线,这些光线的波长和强度都不同,如果没有照射光,这些不一样的光线会慢慢褪去。
根据不同的激发能,可以把荧光分成好几种,(1):电子荧光,一束高速运转的电子书在受到照射光的激发后,所发射的荧光;(2):X-射线荧光,当X-射线作为激发光时所发射的荧光;(3):化学荧光,由电化学和化学进行反应而产生的荧光;(4):摩擦荧光,当两个不同的物质通过相互间的摩擦从而得到的荧光。但是在所有的这些荧光中,光致发光是化学家和科研工作者们探究的最广泛,而且使用的最多的一种是光[1]。
荧光产生的过程如图1.1所示[2],由图可知,处于基态的是分子荧光,当它吸收一些能量以后,分子荧光就会跃迁从而处于电子激发态,基态包括单重态和三重态两种,激发态也是一样的,单重态基本是很多有机化合物的基态,假如用S0代表化学分子的基态,用S1代表物质的第一激发单重态,用S2来代表物质的第二激发单重态,如图所示,能量是按照从低到高的顺序来排列的,同样,三重态的第一激发态为T1,而T2代表的是三重态的第二激发态,当化学分子中的电子从S0跃迁到S1、S2时,因为这个过程发生的比较容易,而且进行的速度非常大,大概只有104秒,但是从S0到S3这个过程却不能很容易的产生。