氟他胺与牛血清白蛋白的相互作用

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摘要：本文应用荧光及紫外光谱法研究氟他胺与牛血清白蛋白 (BSA) 分子间的结合反应，讨论了氟他胺对牛血清白蛋白内源荧光的猝灭机理，测定了结合常数 (KA = 3.56×105 L·mol-1) 和结合位点数 (n = 1.20)。实验表明：在室温下， pH = 7.4的缓冲溶液中，氟他胺对 BSA 内源荧光的猝灭机理为静态猝灭。根据Fōrester 非辐射能量转移理论，求得能量转移效率 E 为 0.55，作用距离 r 为 0.37 nm。并且通过同步荧光技术考察了氟他胺对 BSA 构象的影响。52288

毕业论文关键词：氟他胺，牛血清白蛋白，荧光光谱法

Abstract: The interactions between Flutamide and bovine serum albumin (BSA) were investigated by fluorescence and ultraviolet spectroscopy, discussing the Flutamide for endogenous fluorescence quenching mechanism of bovine serum albumin, determining the binding constant (KA = 3.56×105 L·mol-1) and binding points (n = 1.20). The experimental results revealed that at room temperature, in the buffer solution pH = 7.4, the Flutamide has a strong ability to quench the intrinsic fluorescence of BSA and the interaction has been verified as consistent with the static quenching procedure. Based on the mechanism of the FÊrster energy transference, the transfer efficiency of energy E and transfer distance r between the acceptor TY and donor BSA were obtained at room temperature. (E = 0.55, r = 0.37 nm). And we also investigated the effect of Flutamide on the conformation of bovine serum albumin by synchronous fluorescence technique.

Key words: Flutamide, bovine serum albumin, fluorescence spectrometry

1 前言 3

2 实验部分 4

2.1 试剂与仪器 4

2.2 实验方法 4

3 结果与讨论 5

3.1 pH对反应体系的影响 5

3.2 氟他胺与BSA的荧光光谱 5

3.3 荧光猝灭机理及猝灭常数的测定 6

3.4 氟他胺与BSA作用的结合常数Ka、结合位点数n 7

3.5 氟他胺与BSA分子间的能量转移 9

3.6 氟他胺对BSA构象的影响 10

结论 13参考文献 14

致谢 15

1 前言

从不同角度研究以白蛋白为代表的蛋白质与具有生物活性小分子的相互作用目前已成为药物领域的研究热点之一。研究生物大分子与小分子之间相互作用，特别是具有生物的活性的药物小分子与生物大分子的相互作用，有助于了解药物在体内的运输和分布情况、阐明药物的作用机制及药物的毒副作用[1]。药物与人类生活密切相关，药物的吸收、分布代谢及排泄等直接影响到药物在其作用部位的浓度和有效浓度的持续时间，从而决定着药物作用(药理作用和毒性作用)的发生、发展和消除。蛋白质是重要的天然生物大分子，也是生物体内具有重要生理功能的生物大分子，研究它可以让人们对生命过程和本质的认识大大提高。而血清白蛋白（bovine serum albumin, BSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，作为许多内源性和外源性化合物的存储和转运蛋白，可与许多化合物分子发生相互作用[2]。各种药物浸入人体首先与血清白蛋白结合，通过血浆的存储和运输，到达受体部位产生药理作用。测定血清白蛋白的变化，可为疾病诊断、疗效观察提供有价值的资料和数据。