我国煤烟型城市众多,影响人数庞大。经济高速发展的长三角、珠三角以及能源基地京津冀鲁晋地区,汽车尾气和燃煤都造成PAHs的大量排放,多种环境介质中都能检测到PAHs的存在。在这些地区开展PAHs大气暴露水平与孕、产妇等敏感人群的负荷特征及对胎儿和婴幼儿的潜在影响研究刻不容缓[20]。
1.6 PAHs的分析方法
随着科学技术的不断进步,多环芳烃的检测方法也在不断地发展变化,从最早的柱吸附色谱、纸色谱、薄层色谱(TLC)和凝胶渗透色谱(GPC)发展到现在的气相色谱(GC)、反相高效液相色谱(RP2HPLC),紫外吸收光谱(UV)和发射光谱(包括荧光、磷光和低温发光等),还有质谱分析、核磁共振和红外光谱技术等。较为常用的是反相高效液相色谱法[21]。
1.6.1 PAHs的分析方法
1)荧光分析法
当紫外线照射到某些物质的时候,这些物质会发射出各种颜色和不同强度的可见光,而当紫外线停止照射时,所发射的光线也随之很快的消失,这种光线被称为荧光。由于物质分子结构的不同,所吸收的紫外光波长与发射的荧光波长是不同的,所以可以利用这个特性鉴别物质。当同一种物质的浓度增大(一定范围)时,其荧光强度也随之增强,利用这个特性可对特定物质进行定量分析检测。由于荧光分析法的灵敏度要比一般的分光光度法高2到3个数量级,所以荧光分析法在多环芳烃的分析和检测工作中得到了广泛的应用[21]。由于荧光分析法的灵敏度很高,许多多环芳烃又都具有特征的荧光激发光谱和荧光发射光谱,因此多环芳烃的荧光分析法发展十分迅速。荧光检测方法可以对单种多环芳烃进行分析,并可以得到精密度较高的实验结果。也可以采用平行因子分析和自加权交替三线性分解二阶校正法(计算机处理)与三文荧光光谱相结合,对在未知干扰存在下,土壤提取液中加入的蒽和菲含量进行测定H6I[22]。荧光分析法还可以对特殊固体表面上的多环芳烃进行检测。荧光检测法还可以检测各种状态下的多环芳烃,如大气中,海水、自来水中,以及固体表面及土壤中都可以采用此方法。
2)反相高效液相色谱法(RP2HPLC)
RP2HPLC法测定PAHs,不需高温,对某些PAHs的测定具有较高的分辨率和灵敏度,柱后馏分便于收集进行光谱鉴定等优点[22]。所以近年来RP2HPLC法广泛用于PAHs的分离鉴定和定量测定,已经成为主要的分析方法,特别是对大环、高分子量的多环芳烃,具有其他方法不可替代的作用。RP2HPLC法在十八烷基硅烷(ODS)液相色谱柱(反相色谱柱)上,以甲醇2水为流动相,把经预处理的PAHs分离成单个的化合物,用荧光(或紫外)检测器检测,利用各化合物的保留值、峰高和峰面积进行定性,用外标法进行定量。典型的分析多环芳烃的色谱条件如下[22]:
流动相:85%二次蒸馏水+15%甲醇(A泵),100%的甲醇(B泵),流速:30mL/h。洗脱:(1)92%B泵等梯度洗脱;(2)75%的B泵保持8min,每分钟1%B泵增长到92%保持至出峰完,平衡15分钟。(此二者任选其一)色谱柱:0.46×25cm,ZorbarODS柱。柱温:30℃。进样量:5~10μL。检测器:紫外检测器波长254nm,记录纸速为0.25cm/min。荧光检测器:激发波长286nm,发射波长430nm。实际测定时,可根据仪器和柱型选用最合适的条件。利用RP2HPLC可以分析16种多环芳烃,使用的柱子是Perkin-Elmer HC2ODS,也是反相色谱柱(C18柱)。用乙腈和水作流动相进行等梯度洗脱[23]。结果获得了对16种多环芳烃的完全分离,效果十分理想。16种多环芳烃被洗脱的顺序是:环数越少越先被洗脱出来,保留时间越短;环数相同的多环芳烃,其结构越伸展,环越排列成直线状,则越先被洗脱出来,保留时间越短。
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