氯金酸(上海试剂厂),poly(2-ethyl-2-oxazoline)(PEOZ)(天津希恩思生化科技有限公司),MSA(2-巯基丁酸 C6H4O4S 东京化成工业株式会社 AR),二水合柠檬酸三钠(国药集团化学试剂有限公司 AR),实验均用二次蒸馏水(Thermo SCIENTIFIC),试剂均为分析纯。
2 金纳米球的合成
采用晶种生长法合成金纳米球
A.金纳米球种子的合成
将50 mL 2.5×10-4 mol/L HAuCl4油浴加热煮沸,加入1.75 mL 1%柠檬酸钠煮沸30 min后,撤掉油浴锅,冷却至室温。
B.金纳米球的生长
4个100 mL锥形瓶加入0.8 mL 5×10-3 mol/L HAuCl4和(3.0 mL、0.48 mL、0.12 mL、0.05 mL)15.3 nm金纳米球种子,混合至50 mL,再加入0.24 mL 0.01 mol/L MSA,快速强烈搅拌,过2 h左右,观察其颜色至不再变化,停止搅拌。
3 梯度离心法分离金纳米球
配置质量比为5%、7.5%、10%的PEOZ(MW=200000 g/mol)浓度梯度,依次加入1 mL 10%、7.5%、5%溶液至离心管中,然后静止2-3 min,使每层媒介均匀稳定,有明显的分层现象,然后加入1 mL金纳米球溶液。将离心管移入离心机中,设置转速为5500 g,每5 min观察、记录现象。图2-1中10 min即可得到明显的分层。
将分层好的样品从离心机取出后静止数分钟,然后用注射器分别吸取每层中的样品至离心管中,加入相同体积的二次水,采用6000 g转速离心10 min,取出相同体积的上层清液,以除去过多的PEOZ,重复两次,然后进行表征。
由于离心管中的溶液用注射器不容易操作,就提出了以下设想。就是换一种容易切割的离心管,离心完成后,不用注射器把每一层都吸出来,而是静置一段时间,放入冰箱冷冻,让样品结冰。这样样品溶液就成了固体,把离心管切开取出里面的固体,让后一层层的切开,可以得到比较理想的分离层。可以把每一层放在载玻片中,做扫描电镜。
4 金纳米球的表征
分离提取出的金纳米球溶液通过两次洗涤除去多余的PEOZ之后,超声20-30 min,然后利用移液枪对每层分别提取100 µL溶液至微量比色皿中,通过紫外-可见光光谱分析,研究其光学性质。
超声之后的金纳米球溶液,利用镊子夹住碳膜铜网,用移液枪向铜网上滴加溶液,在室温环境下让其自然蒸发,视溶液浓度重复滴加2-3滴,然后利用透视电镜(TEM)进行尺寸表征。
结果与讨论
从表1中可以看出金纳米球种子的波长最短,吸光度最大。合成的金纳米球随着加入的金纳米种子的减少,吸收波长增加,吸光度变小。说明随着加入种子的减少,合成的球粒径变大,数量减少。在图1-1(a)中看以清晰的看到不同的颗粒(或粒径)大小的金纳米球具有不同的颜色,如果金纳米球溶液中的浓度低,
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