目前,有关加替沙星的测定方法主要有荷移分光光度法[6]、高效液相色谱法[7,9]、高效毛细管电泳法[10],紫外分光光度法[3,7,8,11,20]等,其中报道较多的是高效液相色谱法。虽然高效液相色谱法方法稳定、重现性好,但由于高效液相色谱仪价格较贵,不易普及,方法较为烦琐费时,特别不适于临床急检的需要,普通的分光光度法[13,14,16,17,19]灵敏度低;高效毛细管电泳法用于分析的精确度相对较高,也有较高的灵敏度,但不易掌握的是专属性界定尺度,且高效毛细管电泳仪器昂贵,普遍推广是比较难的;SDS增敏分光光度法[21]测定加替沙星至今还未见文献报道。曾有文献报道左氧氟沙星用此法测定过,但左氧氟沙星数第三代抗菌药,而加替沙星为第四代抗菌药,在药物动力学方面占一定优势,具有一定的应用价值,SDS增敏法提供了测定加替沙星的方便快捷的方法,用此法测定加替沙星的结果令人满意。
本论文采用SDS增敏的分光光度法测定加替沙星,按照实验方法进行扫描得出了加替沙星的最大吸收波长,绘制了扫描光谱图,优化了最佳的实验条件,包括最适宜的pH值,最合适的Zn2+和SDS的浓度,在最适宜条件下做出了标准曲线,用加标回收法测得了回收率,此方法与以往的测定方法相比结果还是较为理想的。 1 实验部分
1.1 仪器与试剂
紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公司);pHS-3C型酸度计(上海理达仪器厂);电子分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)
加替沙星标准溶液:准确量取加替沙星-NaCl注射液(规格100mL含加替沙星0.2g,含0.8gNaCl)10mL,用水稀释成50mL得到1×10-3mol/L的储备液,待用。
盐酸溶液:取盐酸1.0mL于100mL容量瓶中,定容,即得0.1mol/L盐酸溶液,待用。
SDS溶液:准确称取0.2883g十二烷基硫酸钠固体,用适量水溶解于烧杯中,转入100mL容量瓶,定容,便得到0.01mol/L的SDS储备液,待用。
Zn2+溶液:准确称取2.876g的七水合硫酸锌固体,用0.1mol/L的盐酸溶解于烧杯中,转入100mL容量瓶,定容,得到了0.1mol/L的Zn2+溶液。
缓冲溶液:实验采用B-R缓冲溶液来控制溶液的酸度,缓冲溶液是由硼酸、磷酸、醋酸三种酸混合由NaOH调至所需pH值得到的,三种酸的浓度都采用0.04mol/L,NaOH的浓度为0.02mol/L。按一定比例配制pH分别为2、2.5、3、3.5、4、4.5、5.5、6的缓冲溶液,以待使用。
混酸溶液:准确称取0.62g硼酸、0.98g磷酸分别于烧杯中溶解,量取0.5714mL的醋酸,将三种溶液皆转入250mL容量瓶,定容,即得0.04mol/L的混酸溶液,待用。
NaOH溶液:准确称取0.2g的NaOH固体,在烧杯中溶解,静置,在室温下冷却后,转入250mL容量瓶中,用水定容,便得到0.02mol/L的NaOH溶液,待用。
NaCl溶液:准确称取0.0585gNaCl固体,在烧杯中溶解,转移到100mL容量瓶中,定容,即得0.01mol/L的NaCl储备液,待用。
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