目前,各种肝脏疾病已经成为公共健康问题,而有研究表明肝细胞的氧化应激与肝疾病密切相关。肝细胞的氧化应激是指活性氧产生过多或和内源性抗氧化能力降低,氧化系统和抗氧化系统平衡紊乱,而导致肝细胞损伤的病理过程[1]。研究显示氧化应激通过产生过量 ROS、减弱 GSH 等细胞保护蛋白的活性,造成肝细胞线粒体结构和功能破坏、膜通透性增加、流动性丧失,从而发生肝细胞凋亡或坏死。
多糖类化合物具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、免疫调节、降血糖等多种药理活性[2]。。例如:灵芝多糖肽,灵芝多糖肽是灵芝的一个重要组分,灵芝多糖肽具有抗氧化作用,可保护巨噬细胞[3]和ECV304细胞抗氧化损伤[4],可用于防治肿瘤、抗过敏、神经衰弱、延缓衰老等[5-7];竹节参多糖,有延缓衰老作用,竹节参总皂甙有较强的清除超氧阴离子自由基作用,随着药物浓度的增加作用加强,对羟自由基亦具有较强的清除作用[8-11];黄芪多糖,能显著降低丙二醛含量并提高超氧化物歧化酶活力,具有机体抗氧化能力和直接清除自由基等发挥其延缓衰老的作用[12-14]。源`自·751.文/论:文'网,www.751com.cn
紫苏[Perilla frutescens ( L.) Britton]属于唇形科( Labiatae)紫苏属的一年生草本植物,是常用的中草药,又是重要的经济作物,整个植株都具有重要的可发利用价值。目前关于紫苏多糖的相关研究并不多。李冲伟等研究表明紫苏多糖具有保肝降酶的作用,刘少华等研究紫苏多糖抗运动性疲劳的作用[15],但是关于紫苏多糖在抗氧化损伤方面的研究还未见报道。因此,本研究利用H2O2作用LO2 细胞,建立氧化损伤细胞模型,研究紫苏多糖对LO2细胞损伤的保护作用及其可能的作用机制,为紫苏多糖的进一步开发和利用提供实验依据。
1.材料与仪器
1.1供试材料
紫苏粗多糖由本实验室杨军军同学提取,测得总糖含量为76.78%。
细胞株:肝(LO2)细胞购自上海中科院细胞库,由本实验室传代保存。
1.2 实验试剂
Alamar Blue是美国Sigma公司产品;青霉素、链霉素和胰蛋白酶等细胞培养试剂购自南京生兴生物技术有限公司;胎牛血清购自北京全式金生物技术有限公司;DMEM和RPMI 1640培养基为美国Gibco公司产品;丙二醛( MDA) 试剂盒,谷胱甘肽( GSH) 测试盒,超氧化物歧化酶( SOD) 测定试剂盒,过氧化氢酶( CAT) 测试盒为南京建成生物工程研究所产品;其余试剂为国产分析纯。
1.3 主要仪器
Forma Series II 型二氧化碳培养箱购自美国Thermo公司;Synergy 2型多功能酶标仪购自美国BioTeck公司;倒置显微镜购自重庆光学仪器厂;LDE4-2离心机 江苏金坛医疗仪器厂。