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    硫酸亚铁    18.08±0.34    41.68±7.45    5.93±0.95    5.86±0.24
    空白2    6.44±0.17    13.75±2.45    5.48±0.83    5.85±0.01
    氯化钾    7.15±0.10    14.10±2.00    5.08±0.65    5.81±0.00
    磷酸二氢钠    7.04±0.11    10.84±0.33    3.98±0.18    6.57±0.01
    磷酸氢二钠    7.13±0.04    12.79±0.03    4.63±0.02    6.31±0.00
     
    结果显示添加了硫酸镁的培养基总酶活和比酶活都有较好的提高,可进一步对该种金属离子浓度优化。
    4.3离子浓度的优化:
    选择镁离子作为最适添加离子后,在基本培养基基础上分别添加不同浓度的MgSO4•7H2O(g/L):0.1, 0.3, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0。结果见如下表4.2。
    表4.2镁离子浓度对微杆菌细胞产酶的影响
    Mg离子浓度(g/L)    OD值    总酶活(U/L)    比酶活(U/g)    final pH
    0.1    8.09±0.19    13.14±0.11    4.19±0.06    5.62±0.06
    0.3    8.31±0.14    14.68±1.85    4.55±0.50    5.65±0.04
    0.5    10.01±0.19    15.37±1.13    3.96±0.22    5.61±0.07
    1    9.74±0.25    18.28±0.34    4.84±0.03    5.54±0.01
    1.5    9.93±0.12    17.12±079    4.45±0.26    5.64±0.01
    2    10.09±0.14    16.00±0.35    4.09±0.15    5.59±0.01
     
    图4.3镁离子浓度对微杆菌细胞发酵产酶的影响
    结果显示1g/L的MgSO4•7H2O浓度最佳。

    5 产品方案
    5.1产品名称与性质
    名称:生物素中间体二酯
    中文别名:环酸
    英文名:1,3-Bisbenzyl-2-oxoimidazolidine-4,5-dicarboxylic acid
    分子式:C19H18N2O5
    性  质:白色梭柱体结晶。

    5.2性状及理化性质
    分子量:382.41g/mol
    密  度:1.278g/cm3
    熔  点:111.5℃
    溶解性:易溶于醇、醚和乙酸乙酯,微溶于冷石油醚,在水中为溶。
    稳定性:稳定

    5.3产品的质量规格
    产品的收率大于95%(按二酸计算),经液相色谱分析,产品纯度>99.0%
    二酸工业品(>99%),无水甲醇(AR),三甲基氯硅烷(AR)

    5.4产品的生产制度
    工业化日产量:788.4 kg
    平均工作日:300天
    工业化年产量:236.52吨/年

    5.5包装与储藏
    CAS编号:59564-78-2
    包装方法:固态:塑料袋或二层牛皮纸袋外全开口或中开口钢桶;螺纹口玻璃瓶、铁盖压口玻璃瓶、塑料瓶或金属桶(罐)外普通木箱;螺纹口玻璃瓶、塑料瓶或镀锡薄钢板桶(罐)外满底板花格箱、纤文板箱或胶合板箱[5]。
    储存:密封阴凉保存。
    6生产方法与主要工艺流程
    6.1生产方法
    使用间歇式反应,在常压下用二酸,甲醇与三甲基氯硅烷反应,制取二酯。

    6.2主要流程:
    7生产工艺控制和中间体质量标准
    7.1生产工艺控制
    影响此反应的主要因素有:配料比、三甲基氯硅烷的用量和添加时间、反应时间、反应温度等。
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