酵母是一种属于真菌类的单细胞微生物。早在公元前三千多年以前,发酵产品开始被人类通过利用酵母来进行制作[11]。然而作为一种工业制法,从最初的啤酒酵母泥在国内市场上开始销售算起来,酵母工业的发展历史仅为两百多年[12]。
活性干酵母作为一种没有失去其活性的酵母产品,它是以固体形式存在的。活性干酵母具有两个主要的特征:其一是在常温下长期贮存却不失去活性,其二是将活性干酵母在特定的条件下复水活化以后,即可恢复成自然状态并且具有正常酵母活性的细胞[13]。在酵母中,细胞含量超过200亿cfu/g,其含水量小于6%的这一类活性干酵母被称为高活性干酵母。高活性干酵母具有复水快、含水量低、使用方便、贮藏时间长等优点。由于活性干酵母本身具有的性能稳定、易于运输等优点,从而被广泛地应用于发酵面食加工和酿酒领域[14]。
论文以饱和吸附花青素的失活酵母菌为主要条件,利用甲醇和乙醇作为解吸附试剂对花青素进行解吸附提取的研究。以紫甘薯果汁为研究对象,探讨单因素和正交试验对饱和吸附花青素失活酵母菌中花青素提取条件及工艺优化,筛选出最佳提取剂和提取工艺条件。在单因素实验的基础上,考察甲醇乙醇浓度、酸性浓度、超声波解吸附温度和超声波解吸附时间4个因素,采用分光光度计法对花青素含量进行定量分析,从而研究紫甘薯果汁花青素的最佳解吸附工艺。
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验材料:
紫薯糖浆:浓度为58—60度的紫薯浓缩汁,大连海升果业有限责任公司;无水失活干酵母(Yeast);戊二醛(GA):浓度为50%,分子量为100.158天津市大茂化学试剂厂;甲醇:浓度为100%,天津市大茂化学试剂厂;无水乙醇:浓度为100%,天津市大茂化学试剂厂;盐酸:分子量为36.46的实验室盐酸,源`自·751.文/论:文'网,www.751com.cn普陀市东方化学试剂有限公司;蒸馏水:江苏师范大学生科院提供;
2.1.2 实验器材与设备:
移液枪:1000ul,200ul,上海汉林实验仪器有限公司;电子天平:FA1004,上海舜宇恒平科学仪器有限公司;糖度计:LB32T,广州市速为电子科技有限公司;恒温培养摇床摇床:THZ-100B,上海一恒科学仪器有限公司;离心机:SC-3610型,安徽中科中佳科学仪器有限公司;数控超声波清洗器:KQ3200DE,昆山市超声仪器有限公司;酶标仪:Biotek Synergy H1全功能微孔板检测仪。
2.2 方法
2.2.1制备活化酵母(GY):
称量少许的Yeast溶于蒸馏水中,震荡摇匀,则酵母溶液的浓度为为50mg/ml,取若干酵母溶液至500ml烧杯中,保持戊二醛的浓度为1.0mol/L,酵母溶液的浓度为1mg/ml.放在磁力搅拌器进行震荡活化1小时,温度为30℃,转速为150rpm,接着放入冰箱,自然沉降一晚。次日取出,水洗3次,每次静置2小时,最后定容备用。
2.2.2 饱和吸附花青素活化酵母的获得:
在紫薯汁糖度为12°Brix的体系中加入浓度为10mg/ml的活化酵母菌进行花青素的饱和吸附,吸附条件为在30℃环境下,进行150rpm震荡1小时。摇床结束后,置于6000rpm离心机内离心3min,将离心后的离心管中的上清液取出,下层沉淀即为饱和吸附紫甘薯花青素的活化酵母。