产玉米生淀粉糖化酶菌株的筛选及其发酵条件优化

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摘要：利用透明圈法再经单菌分离纯化从学校食堂周围和面粉厂周围的土壤中筛选出一株酶活达到149 U/mL的生淀粉糖化酶产生菌W1。通过不同的碳源，有机氮源，无机氮源，优化其发酵条件。本实验得出产生淀粉糖化酶菌株的最适碳源为生玉米淀粉，有机氮源为蛋白胨，无机氮源为尿素。65734

毕业论文关键词：生淀粉糖化酶，发酵条件，透明圈法

Abstract：W1 RSGA was isolated from soil of around flour mill and school canteen respectively with the methods of transparent circles, single separation and purification. The amylase activity of the strain was 149 U/mL . It could optimize the optimal formation conditions by using different carbon sources, different organic nitrogen sources and different inorganic nitrogen sources . Some conclusions could be drawn. First raw corn starch was optimal Carbon sources. Then peptone was optimal organic sources. What’s more , ammonium nitrate was optimal inorganic sources.

Keywords：RSGA, Fermentation conditions, Transparent circles

1 前言 4

2 材料与方法 4

2.1 材料 4

2.1.1 土样 4

2.1.2 培养基组成和培养条件 5

2.1.3 主要仪器设备 5

2.2 方法 5

2.2.1 菌种筛选 5

2.2.2 酶活的测定 6

2.2.3 不同条件对菌株产糖化酶的影响 6

3 结果与分析 6

3.1 产玉米淀粉糖化酶菌株的筛选 6

3.2 不同碳源对菌株产酶的影响 7

3.3 不同有机氮源对菌株产酶的影响 8

3.4 不同无机氮源对菌株产酶的影响 9

结论 10

参考文献 11

致谢 12

1 前言

生淀粉糖化酶是指对没有蒸煮糊化过的生淀粉颗粒表现出具有很强水解活性的一类酶[1]。生淀粉糖化酶可以将传统的淀粉的糊化，液化和糖化合并为一步直接糖化成葡萄糖[2]，如果把它用在无蒸煮的酒精发酵方面可以大大降低总能耗，其数值可达到30%~40%[3]。能够产生生淀粉糖化酶的微生物有许多，其中主要有黑曲霉 [4-5]、根霉 [6]、噬纤维菌属 [7，8]、芽孢杆菌[9]等。

生淀粉糖化酶在酿酒中有着的广泛的应用前景，20世纪50年代日本人首先提出生淀粉糖化酶酿酒技术，该技术的利用来源于世界能源危机，以酒精发酵为切入点。20世纪70年代中东战争爆发引起了世界能源危机，各种行业为了避免受到能源的影响，而积极寻求各种途径，生料酿酒课题便在这样的背景下应运而生。我国专家周恒刚为生料酿酒的发展奠定了基础。我国在生料发酵方面虽然起步晚，但应用早、发展快，20世纪80年代我国对生料酿酒的研究达到了高潮，并且随着酶工程这一课题的快速发展，取得了实质性的进步。实践证明，生料酿酒与传统酿酒技术相比：能耗低、成本低、酒质好。生料酿酒技术的利用增强了企业的竞争力和生命力，增加粮食等农产品的附加值，推动了农村的发展。因此，值得国家大力推广[10-11]。

生淀粉糖化酶在工业中也有特别大的应用前景。在粮食与食品加工中过程中淀粉生产加工是重要环节。淀粉的生产和深加工是一个巨大的工业体系，在整个国民经济中占有必不可无少的地位。随着科技的进步和发展，淀粉不再是一种食品的原料，而是一种具有很高开发价值的再生能源。它已经被广泛的应用于造纸、纺织、食品、饲料、医药、日化、石油等各种行业。它也是发酵工业的原料，通过发酵可以生产很多的生活用品如淀粉糖，工业原料譬如：乙醇、氨基酸、甘油等，也可以生产具有高附加值的生物制剂和药品[12-13]。